[发明专利]一种磁性微生物捕获材料及微生物捕获方法

说明书

本发明提供了一种广谱性高效性的微生物捕获材料及生物捕获方法，该微生物捕获材料同时连接具有广谱性微生物捕获能力的甘露糖凝集素和具有高效特异性微生物捕获能力的免疫球蛋白G，通过甘露糖结合凝集素与免疫球蛋白G的联用的复合协同效应，极大地增强磁珠的捕获效率。

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其是涉及磁性微生物捕获材料及微生物捕获方法。

背景技术

微生物与人类的生活息息相关，从食品生产到医药卫生，人们都在时刻关注着微生物。但在微生物的快速检测中常常面临着尴尬的处境，有研究者将基质辅助激光解析电离飞行时间质谱，傅里叶变换红外光谱，拉曼光谱等谱学手段用于微生物的检测，但由于样本中微生物含量低或者是样本基底过于复杂，往往无法实现直接检测或者是检测不到微生物信号。这就需要一种具有广谱性高效性的微生物捕获材料，在微生物鉴定前进行微生物的富集以及去除复杂的基底，再与上述的谱学手段联合使用，从而实现微生物的快速检测。

微生物的另一大功能则是在微生物免疫领域的以发挥。脓毒症是一种高危疾病，当机体受到感染时，由于自身的免疫反应使得自身组织和器官受到伤害。脓毒症每年导致全球数百万人死亡，并且是住院患者死亡的最常见原因。全世界败血症的发病率估计为每年1800万例。脓毒症通常用静脉输液和抗生素进行治疗，但对于不同的病人，微生物的感染情况不同，通常需要进行血培养，获得微生物感染的情况之后再使用相应的抗生素，但是情况危急的病人常常在血培养细菌鉴定过程中病情就进一步恶化，导致死亡。当然，有时为了挽救病人的生命，医护人员会同时使用多种广谱性的抗生素进行治疗，长此以往，微生物就会产生耐药性，当病人再一次感染时就没有可用的抗生素了。此时，如果有广谱性高效性的微生物捕获材料，能将微生物从病人的体液中分离出来，实现疾病治疗的目的。通过材料将微生物从病人体内分离，不需要进行前期的微生物鉴定，也不需要使用大量的抗生素使微生物产生耐药性，同时可以大幅的减小脓血症治疗的费用。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种广谱性高效性的微生物捕获材料。通过甘露糖结合凝集素与免疫球蛋白G的联用的复合效应，极大地增强磁珠的捕获效率。

本发明采用以下技术方案：

一种磁性微生物捕获材料，为甘露糖结合凝集素与免疫球蛋白G同时连接在磁珠表面。

进一步，所述甘露糖结合凝集素为重组蛋白。

进一步，所述磁珠为羧基修饰的磁珠。

进一步，将羧基修饰的磁珠进行活化，其具体步骤为：取羧基修饰的磁珠溶液，去除磁珠自身所带的溶剂，加入N-羟基琥珀酰亚胺溶液和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐反应后，通过磁性分离得到活化的羧基修饰的磁珠。

进一步，将甘露糖结合凝集素与免疫球蛋白G与活化后的磁珠相连接，用甘露糖结合凝集素与免疫球蛋白G的混合溶液将活化好的磁珠重悬，进行偶联反应，将偶联反应后的磁珠从溶液中分离出来，得到具有微生物捕获能力的磁性微生物捕获材料。

本发明还提供一种微生物捕获方法，将上述的磁性微生物捕获材料置于体系中，捕获微生物。

进一步，所述体系为水体，食物或各种体液中的一种或多种，体系中具有钙离子。

进一步，将磁性微生物捕获材料用后续实验所用的缓冲液清洗后直接加入含微生物的溶液中进行捕获。

进一步，将磁性微生物捕获材料用含0.05％吐温20的磷酸盐缓冲液清洗三次后，直接加入含微生物的溶液中。

进一步，完成微生物捕获后通过外加磁场将磁珠从体系中分离。

本发明的有益效果：