[发明专利]一种高产漆酶的疣孢漆斑菌及应用有效
申请号: | 201910105654.3 | 申请日: | 2019-02-01 |
公开(公告)号: | CN109868224B | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | 孙旸;陈光;苟泽昌;苏瑛杰;王刚;陈欢;于潇潇 | 申请(专利权)人: | 吉林农业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/02;C12R1/645 |
代理公司: | 重庆晶智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 50229 | 代理人: | 李靖 |
地址: | 130118 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高产 疣孢漆斑菌 应用 | ||
1.一种漆酶的生产方法,其特征在于,按如下步骤:
(1)、将粉碎的玉米秸秆浸泡在单宁酸溶液中;单宁酸的浓度为1-15g/L,玉米秸秆与单宁酸的固液比为1:8-24、以克/mL对应单位,浸泡温度为90-130℃、时间为50-65min;
(2)、以上反应结束、将玉米秸秆粉末抽滤至含水量50-60%,然后烘干至含水量在10-13%;
(3)、将步骤(2)所得玉米秸秆粉末作为唯一碳源制作发酵培养基,所述发酵培养基配方为:单宁酸处理后的玉米秸秆为碳源、土豆、蛋白胨、酵母粉、Tween80、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O,菌种采用疣孢漆斑菌突变菌株3H6;
(4)、摇瓶发酵培养:160r/min、温度30℃、时间96h;
(5)、将步骤(4)的发酵液离心,得到上清液中的粗酶,在粗酶液中用(NH4)2SO4溶液在4℃内分步沉淀蛋白质;用50 kDa分子量截留的超滤浓缩器将漆酶富集、浓缩和脱盐制得,并在4℃保存;
所述疣孢漆斑菌(
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