[发明专利]靶向CLDN18.2的双特异性抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种双特异性抗体，其包括第一蛋白功能区和第二蛋白功能区，其特征在于，所述第一蛋白功能区为靶向结合CLDN18.2抗原的蛋白功能区，其包括轻链可变区和重链可变区；所述第二蛋白功能区为靶向结合非CLDN18.2抗原的蛋白功能区；其中，所述第一蛋白功能区中，

所述轻链可变区包含以下CDR：

如SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列的CDR1、如SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列的CDR2和如SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列的CDR3；或，如SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列的CDR1、如SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列的CDR2和如SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列的CDR3；

和，所述重链可变区包含以下CDR：

如SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列的CDR1、如SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列的CDR2和如SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列的CDR3。

2.如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述第一蛋白功能区中，所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:29-33中任一个所示的氨基酸序列；和/或，所述重链可变区序列包含如SEQ ID NO:34-37中任一个所示的氨基酸序列。

3.如权利要求2所述的双特异性抗体，其特征在于，所述第一蛋白功能区包含以下轻链和重链：所述轻链包含如SEQ ID NO:38或SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列或者与其具有至少99％序列同一性的突变；和/或，

所述重链包含如SEQ ID NO:39所示的氨基酸序列或者与其具有至少99％序列同一性的突变。

4.如权利要求3所述的双特异性抗体，其特征在于，所述第一蛋白功能区包含以下轻链和重链：

所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:38所示，所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:39所示；或，

所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:42所示，所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:39所示。

5.如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述第一蛋白功能区为抗体或其抗原结合片段，所述第二蛋白功能区靶向免疫检查点抗原或肿瘤治疗靶点；或，所述第一蛋白功能区为抗体或其抗原结合片段，所述第二蛋白功能区为细胞因子和细胞因子受体或它们的片段。

6.如权利要求5所述的双特异性抗体，其特征在于，所述免疫检查点抗原包括PD-1、PD-L1、Tim3、LAG3或CD47，所述肿瘤治疗靶点包括SIRPα；所述细胞因子包括TGFβ、IL10和CSF-1，所述细胞因子受体包括TGFβRII、IL10受体和CSF-1R。

7.如权利要求5所述的双特异性抗体，其特征在于，所述第二蛋白功能区为抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、抗Tim3抗体、抗LAG3抗体、抗CD47抗体、抗CD3抗体和抗CSF-1R抗体。

8.如权利要求7所述的双特异性抗体，其特征在于，所述抗PD-1抗体为Nivolumab、Pembrolizumab或者Ba08，所述抗PD-L1抗体为Atezolumab、Avelumab或者Durvalumab，所述抗CD47抗体为hu5F9或iMab，所述抗CD3抗体为Blincyto或AMG420中结合CD3的轻、重链可变区序列构建的抗体。

9.如权利要求5所述的双特异性抗体，其中所述抗体或其抗原结合片段为免疫球蛋白、scFv、Fab、Fab’或F(ab’)₂。

10.如权利要求9所述的双特异性抗体，其特征在于，所述免疫球蛋白的恒定区为人抗体恒定区，所述人抗体恒定区包括人抗体轻链恒定区和人抗体重链恒定区。