[发明专利]具有免疫受体的工程化T细胞治疗癌症的用途

说明书

本发明公开具有免疫受体的工程化T细胞治疗癌症的用途。所述的嵌合抗原受体由胞外信号肽、抗原结合结构域、胞内第一传导结构域和胞内第二传导结构域组成，包含以免疫受体形式的胞内第一传导结构域。本发明提供了多种嵌合抗原受体氨基酸序列，并提供了特异性针对CD19恶性血液肿瘤的嵌合抗原受体及CAR‑T细胞。在血液肿瘤杀伤试验中，明显加强了CAR‑T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力，在临床应用中展现出良好的安全性和抗肿瘤活性。

技术领域

本发明涉及肿瘤免疫治疗技术领域，提供了治疗人癌症的组合物和方法。本发明包括涉及基因工程修饰的T细胞，以表达CAR，其中CAR包括抗原结合结构域、第一传导结构域和第二传导结构域。本发明还涉及编码此类跨膜多肽的载体，以及用于免疫治疗的在其表面表达所述CAR的免疫细胞。本发明开辟了对用于治疗癌症的有效的过继性免疫治疗策略的道路。

背景技术

随着肿瘤免疫学理论和临床技术的发展，嵌合抗原受体T细胞疗法(Chimericantigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T)成为目前最有发展前景的肿瘤免疫疗法之一 [Schmitz M，et al.Chimeric antigen receptor-engineered T cellsforimmunotherapy of Cancer.J Biomed Biotechnol，2010，doi：10.1155/2010/956304.]。嵌合抗原受体(CAR)是CAR-T 的核心部件，CAR能针对所选择的免疫细胞重定向其特异性和反应性，因此赋予T细胞 HLA非依赖的方式识别肿瘤抗原的能力，这使得经过CAR改造的T细胞相较与正常T 细胞受体(TCR)应答不同，不受MHC限制，具有活化和增殖的能力，因此具有高效的杀伤肿瘤细胞的能力。嵌合抗原受体(CAR)在T细胞上表达合成蛋白，其将抗体的抗原识别片段(如抗体单链可变区片段)与胞内信号结构域融合。在与表达scFv的同源抗原的靶细胞相互作用时，在T细胞上表达的CAR的表达引起T细胞激活杀伤靶细胞。目前CAR这些研究采用的是在scFv和CD3ζ链胞内结构域融合形成嵌合受体的基础上，加入4-1BB或CD28共刺激分子的第二代CAR-T细胞，以及在第二代CAR-T细胞的基础上，将两个共刺激分子4-1BB和CD28进行串联的第三代CAR-T细胞。基于T淋巴细胞的过继性免疫治疗在部分肿瘤中取得了一定的效果，并且该种免疫治疗方法可以克服抗体治疗的缺陷，但在大多数肿瘤的疗效仍不能令人满意[Grupp SA，et al.Adoptive cellulartherapy.Curr TopMicrobiol Immunol.，.2011；344：149-72.]。这些CAR都是基于单一嵌合分子设计的能够引发抗原特异性T细胞应答，但天然免疫受体通常是由分开的配体结合区和含ITAM的信号链组成的多链复合物，例如T细胞受体TCR-CD3复合物。多链免疫受体复合物的潜在益处是多方面的，包括通过配体结合和信号传导分子之间的多重相互作用获得的更大的信号多样性，以及持续的ITAM信号传导。相关研究报道新一代的CAR以跨膜受体DAP12与杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)组合形成CAR的信号传导结构[Generation of potent T-cellimmunotherapy for cancer using DAP12-Based multichain chimericimmunoreceptors.Cancer Immunology Research,2015,3(7):815-826.]，在众多配体中，DAP12由于能够和多种激活型受体结合形成免疫激活型复合物进而通过磷酸化Syk 或Zap70介导激活型的信号受到格外关注。