[发明专利]一种可加压的流式电穿孔装置

说明书

本发明的可加压的流式电极管装置根据压水井的原理，提供了一种通过可移动的活塞实现自动进液并加压，抑制电穿孔过程中细胞液中气泡的产生，并有效清除积累附着在电极及管体上的死细胞等糊状物的电转染装置。

技术领域

本发明涉及电穿孔领域，涉及一种可加压的流式电穿孔装置，更具体而言，本发明涉及一种通过活塞加压的方式抑制电穿孔过程产生气泡的流式电穿孔装置。

背景技术

细胞膜是包围在细胞外周的一层薄膜，是细胞与外界进行选择性物质交换的通透性屏障。细胞膜使细胞成为一个独立的生命单位，并拥有一个相对稳定的内环境。周围环境中的一些物质可以通过细胞膜，其它的物质则不行。细胞可以通过细胞膜从周围环境摄取养料，排出代谢产物，使物质的转运达到平衡状态。所以，细胞膜的基本功能就是维持细胞内微环境的相对稳定并有选择地与外界环境进行物质交换。

研究发现，如果对细胞施加一定强度的电刺激并持续一段时间，就可以诱导细胞膜上产生一些微孔，使细胞的通透性增强，所谓细胞电穿孔(Electroporation)就是指细胞在外加脉冲电场的作用下，细胞膜脂双层上形成瞬时微孔的生物物理过程。电转染(Electrotransfection)是利用电穿孔技术将外源的生物大分子，如DNA、RNA或蛋白质导入细胞的技术。当细胞膜发生电穿孔时，其通透性和膜电导会瞬时增大，使亲水分子、DNA、蛋白质、病毒颗粒、药物颗粒等正常情况下不能通过细胞膜的分子得以通过微孔进入细胞。在短时间内撤除电刺激后，细胞膜上微孔消失，细胞膜重新成为选择性通透屏障。

与传统的化学转染和病毒转染相比，由于电转染具有无化学污染、不会对细胞造成永久性损伤、效率较高等优点，在生物物理学、分子生物学、临床医学等领域有着广阔的应用前景。

虽然电转染作用的机理并不完全清楚，但在本文中细胞电转染是公知的，包括细胞膜脂双层的移动，导致在膜上形成暂时性的微孔，允许外源性分子通过微孔进入细胞。

现有技术中，主要有三类方法来完成细胞电转染的过程：将细胞放置于一对相距数毫米至数厘米的平行电极之间。使细胞在电极之间的电场中受到电刺激，以实现电转染的目的。例如，美国专利US5389069。

使用微型针状电极扎入组织或细胞液中对细胞进行电击，达到电转染的目的。例如，美国专利US5389069。

将一个腔室放置在一对平行电极之间，使得细胞的悬浮溶液在腔室中流动的同时受到电击。例如，美国专利US6773669。

中国专利CN201010242144公开了一种流式电转染装置及系统，该系统包括：流式电转染装置，其中包括：基板，以及制作在基板上的电极，所述的电极，是平行并成对放置的，每对电极包括相对设置的阳极和阴极；置于电极之上的限制流体流动的通道；所述通道起始端具有多个入口分支通道，并汇聚成一条主通道，结束端具有多个出口分支通道，所述通道上方设置具有多个流体入口及出口的顶盖；注射泵，由管道连接到所述流式电转染装置中顶盖的入口及出口控制流体的流速；电压源，由电连接件连接电极设定并产生脉冲电压。流式电转染系统利用流体通道以及相连接的注射泵来实现各种悬浮液在流体通道中的连续流动，从而使细胞被电转染的过程能够持续进行，实现快速处理大量样品。

中国专利CN201610806987公开了用于细胞的电转染的一次性用品，其包括：在所述一次性用品的内部的流体隔室；第一流体端口，其用于向所述流体隔室提供细胞悬液；以及第二流体端口，其用于将包括待被电转染到所述细胞中的至少一种化合物的流体递送至所述流体隔室；设置在所述流体隔室中的第一电极和第二电极；至少一个出口端口，其递送来自所述流体隔室的所述流体，其中所述第一流体端口和所述第二流体端口与混合通道流体连通，所述混合通道与所述流体隔室流体连通。