[发明专利]一种草果优良单株的组织培养方法

说明书

一种草果优良单株的组织培养方法，它涉及植物组织培养技术领域。它包括如下步骤：步骤一、优良单株选择；步骤二、外植体的选择；步骤三、外植体的处理与消毒；步骤四、诱导培养；步骤五、增殖培养；步骤六、生根培养；步骤七、炼苗移栽。本发明有益效果为：本发明以优良单株的幼嫩芽体为繁殖材料，利用植物组织培养方法建立了草果的快速繁殖体系，为草果良种繁育与推广应用提供了技术保障，是解决草果生产中优质种苗短缺以及提升草果产业建设质量的有效途径。本发明以优良单株的幼嫩芽体为繁殖材料，采用无性繁殖方式培育无性系苗木，培育苗木具有良好的遗传稳定性，能将优良单株上的优良性状完全地遗传给无性系后代。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种草果优良单株的组织培养方法。

背景技术

草果(Amomum tsao-ko revost et Lemaire)是姜科豆蔻属多年生草本植物，生长于南亚热带及中亚热带的热带雨林、季雨林中。主要分布于云南、广西、贵州、海南、四川、福建，以及越南、老挝北部的部分地区。云南是草果主要栽培地，草果栽培已有1000多年的历史，主要栽培于南部、东南部、西南部和西部，包括红河、文山、西双版纳、普洱、德宏、保山、怒江7州(市)31个县(市)，其中发展最快、产量最高的是红河州的金平县、文山州马关县等。草果具有特殊浓郁的辛辣香味，能祛除腥气，是烹调佐料中的佳品。其味辛性温，有温中健胃、消食顺气、祛寒祛湿的功能，用于治疗心腹疼痛、食积不消、食欲不佳、咳嗽痰多、胸满腹胀等症，为《中国药典》(2010年)收载的常用中药及食用调味佳品,是食药两用的植物。草果一般种植后3年开始结果，7年进入盛果期，可连续结果20年甚至更长，因此它具有省工、受益时间长、经济价值高的特点,被称为“山中摇钱树”。目前云南省草果种植达20多万亩，种植面积和产量占全国90％以上，是草果适生区山区群众重要的经济来源，在部分县区甚至是群众家庭经济收入的唯一来源。

草果的繁殖方式通常分为种子繁殖、分株繁殖和组织培养繁殖。种子繁殖是目前草果种苗生产的主要方式，它具有繁殖速度快，育苗成本低等特点，但由于草果遗传不稳定，植株及花的开放行为具有二型性，是高度杂合的异花授粉植物，后代分化较大，况且当前种苗培育并没有对种子来源进行严格筛选，见种就采、见苗就栽现象普遍存在，草果种苗种植后无论是在长势、结实率、产量等方面均表现出明显的差异，种植林分结果少甚至不结果现象普遍存在，对草果产业建设的质量造成了较为严重的影响，一定程度上限制了草果在脱贫攻坚中作用的发挥以及农户种植草果脱贫的积极性。分株繁殖具有成林快、结果早、丰产性稳定等特点，但由于受到母株来源的限制，繁殖效率低，培育苗木数量有限，难以进行规模化生产，不能满足生产发展需要，该方式仅限于小面积内的草果林改造和更新。组织培养繁殖是目前快速繁殖优良品种或单株的最佳方法，它具有繁殖速度快、周期短，能在短期内提供大量与母本性状一致的优质种苗用于生产的特点，以该方式培育的种苗具有生长速度快、抗病性强、丰产性好等特点，已广泛应用于桉树、杉木等用材林、石斛、白芨等中药材以及马铃薯等农作物的良种繁育与良种推广。草果的组织培养仅见2006年萧洪东等以草果茎尖为外植体,MS为基本培养基,探讨不同浓度的培养基因子,对草果不定芽的诱导、增殖分化、生根情况和试管苗移栽成活率的影响。结果表明:以MS+6-BA6mg/L+NAA0.1mg/L+TDZ0.05mg/L的培养基对不定芽增殖分化效果较好,增殖倍数达到2.34，不定芽叶色绿，苗粗壮，整体感最好。糖浓度对草果不定芽分化增殖有一定影响,以糖浓度为30-35g/L增殖分化效果较好。在草果不定芽生根中,以1/2MS+IBA0.2mg/L、1/2MS+NAA0.2mg/L效果较好。出根率较高,须根最多,平均根数最多,移栽成活率为100％。