[发明专利]温度敏感性生物凝胶制剂及其应用

说明书

本发明涉及一种温度敏感性生物凝胶制剂，以质量计，包括以下比例的各组分：间充质干细胞外泌体20‑30份、泊洛沙姆407 20‑28份、泊洛沙姆188 5‑10份、用于调节胶凝温度和药物释放特性的高分子稳定剂0.9‑2.4份和水32‑54份。利用生物相容性可降解高分子聚合物为间充质干细胞外泌体的载药基质，加入高分子稳定剂调节胶凝温度和药物释放特性，从而使载入的MSCs外泌体持续释放，减少给药频率，防止药液的泄露，提高生物利用度，为治疗IUA提供安全、有效、临床应用方便的制剂。

技术领域

本发明涉及干细胞应用技术领域，尤其涉及一种温度敏感性生物凝胶制剂及其应用。

背景技术

间充质干细胞(MSCs)是一类来源于中胚层，具有自我更新、增殖和多向分化潜能的成体干细胞，能够分化为成骨细胞、成软骨细胞和成脂肪细胞。MSCs可以从骨髓、脂肪组织、肺、肝、脾、胎盘、羊水、脐血、脐带等多种组织中分离获得。由于MSCs具有易于分离、多向分化、独特的免疫表型和免疫调节的能力，被广泛应用于组织工程和免疫治疗方面。

子宫内膜损伤后修复障碍是导致月经过少、宫腔粘连、闭经和继发不孕等临床常见疾病的重要原因，其中最常见的是人工流产后发生的宫腔粘连(IUA)。

IUA为子宫内膜基底层损伤后修复障碍导致的宫腔部分或全部粘连闭塞，从而引起月经异常，周期性腹痛，不孕及反复流产等一系列并发症，目前多以宫腔粘连分解术治疗，术后于宫腔内放置宫内节育器、球囊导尿管或宫腔形状气囊等支架，能部分阻隔宫腔创面，预防再粘连。然而存在分离效果有限，易引起逆行感染等缺点。因此IUA严重威胁女性的生殖健康，已成为临床上亟待解决的难题。

近年研究发现，IUA的发生可能与子宫内膜干细胞减少、缺失或功能障碍有关。体内移植实验证明，间充质干细胞能迁移到病变部位，促进其修复。路平等发现，MSCs可定植于子宫内膜损伤小鼠的子宫内膜组织(路平,et al.小鼠骨髓间充质干细胞在子宫内膜损伤小鼠子宫内膜中的定位.郑州大学学报(医学版)1(2015):101-104.)。Nagori等发现移植骨髓间充质干细胞可有效修复子宫内膜缺陷，包括不孕及子宫内膜厚度过薄(Nagori,C.B.et al.Endometrial regeneration using autologous adult stem cells followedby conception byin vitrofertilization in a patient of severe asherman'ssyndrome.Journal of Hμman Reproductive Sciences,4(1),43-48.)。研究表明，MSCs可能主要通过旁分泌作用参与细胞间的交流。其中外泌体被认为是发挥主要作用的因子。

外泌体是活细胞分泌的膜性囊泡，直径约30～100nm，内含蛋白质、mRNA、microRNA等，可在细胞间进行物质传递。MSCs来源的外泌体疗效类似于母细胞功能，对缺血性心脏病、肾损伤、肺损伤均有修复作用。如MSCs来源的外泌体在肾脏损伤动物模型中可促进肾脏修复；在大肠杆菌诱导的肺损伤小鼠模型中，MSCs来源的外泌体通过调控角质细胞生长因子mRNA水平，促进肺上皮修复。在肝纤维化的疾病模型中，MSCs来源的外泌体主要抑制EMT减轻肝纤维化程度。外泌体可获得与MSCs移植类似的疗效，避免了干细胞治疗带来的风险，为临床患者提供了治疗新策略。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种温度敏感性生物凝胶制剂及其应用，利于具有生物相容性的可降解高分子聚合物为凝胶基质，同时作为间充质干细胞外泌体的载药基质，加入高分子稳定剂调节胶凝温度和药物释放特性，使载入的MSCs外泌体持续释放，减少给药频率，防止药液的泄露，提高生物利用度，为治疗IUA提供安全、有效、临床应用方便的制剂。