[发明专利]蝉拟青霉发酵培养基、蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法

说明书

本发明提供蝉拟青霉发酵培养基、蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法，其中该蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)发酵培养基的原料组分包括笋头、磷酸二氢钾、硫酸亚铁和硫酸镁。该蝉拟青霉发酵培养基可作为蝉拟青霉制备麦角甾醇的发酵培养基；同时，该蝉拟青霉发酵培养基以笋头为主要原料，能够合理利用笋头资源，解决了食用或加工后绝大多数的笋头残渣被随意丢弃或进行简单填埋处理，造成资源浪费又带来了环境污染的问题，具有潜在经济价值,市场前景非常广阔。

技术领域

本发明涉及药用真菌的深层发酵技术领域，特别涉及一种蝉拟青霉发酵培养基、一种蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法。

背景技术

《中药大辞典》中记载蝉拟青霉含有糖原、环肽类、甘露醇、核苷类、多种生物碱及麦角甾醇等多种活性成分，具有多方面药理作用。其中，麦角甾醇是细胞内各种膜结构的重要组成成分，对膜的完整性、渗透性、流动性及细胞活力等方面起重要作用，可以增强人体抵抗疾病的能力，具有明显的抑菌，预防心血管疾病，抗肿瘤，降血脂，延缓衰老等疗效；且麦角甾醇为维生素D2的前驱物，是合成维生素D2的前体和生产“可的松”、“黄体酮”、芸苔素内酯和抗癌药物等甾醇类药物的重要原料。

人们研究发现，将蝉拟青霉菌丝体进行发酵培养，可以从蝉拟青霉发酵产物中提取麦角甾醇。但在实际研究中发现，麦角甾醇产量受多种因素影响，其中蝉拟青霉的发酵培养基是主要的一个因素。目前，对于提高麦角甾醇产量的蝉拟青霉发酵培养基研究较少，仍然使用一些常规的蝉拟青霉发酵培养基，从而限制了的蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的技术发展。

中国专利CN104046570B专利名称《一种提高蝉拟青霉液体发酵产物产量及产物活性的方法》，公开了将由薏苡仁10-40重量份、黄芪10-40重量份、枸杞10-40重量份和白术10-40重量份组成的中药材经水溶液提取，得到中药复合水提液再将制备的中药复合水提液、白术内酯及吐温80加入发酵基础培养基中，得到蝉拟青霉发酵培养基。其通过添加特定种类的中药复合水提液、白术内酯及吐温80可显著提高蝉拟青霉的生物量和多糖产量，同时多糖的活性也有明显的增大。

中国专利CN106190865A专利名称为《一种提高蝉花真菌生物量和活性成分含量的液体发酵培养基配方》，公开了培养基组成包括蔗糖30-40g/L、蛋白胨15-25g/L、KH₂PO₄0.5-1.5g/L和MgSO₄·7H₂O 0.5-1g/L。其通过对发酵培养基进行设计优化，获得了最佳的碳源、氮源和无机盐，及相应的浓度，可以大幅提高蝉花真菌的生物量和活性成分-虫草酸的含量。

综上所述，如何获得一种适用于蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的发酵培养基正是本领域行业的诉求。

发明内容

为解决背景技术提到的问题，本发明提供一种蝉拟青霉发酵培养基，所述蝉拟青霉发酵培养基的原料组分包括笋头、磷酸二氢钾、硫酸亚铁和硫酸镁。

进一步地，所述蝉拟青霉发酵培养基包括笋头100-500g/L、磷酸二氢钾1-4g/L、硫酸亚铁0.03-0.08g/L、硫酸镁0.6-1.5g/L，pH为5-8。

进一步地，所述蝉拟青霉发酵培养中的笋头由笋头残渣与水混合后粉碎制得。

本发明还提供一种蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法，包括如下步骤：

步骤一、将保藏的蝉拟青霉菌种接入活化培养基活化，备用；

步骤二、将步骤一已活化的蝉拟青霉菌种接入到上述蝉拟青霉发酵培养基中，经液体发酵，得发酵产物；

步骤三、将步骤二的发酵产物进行分离提纯获取麦角甾醇。

进一步地，步骤一的活化培养基由葡萄糖10-30g/L、蛋白胨5-15g/L、磷酸氢二钾0.5-2.0g/L、硫酸镁0.1-1.0g/L构成，pH为5-8。