[发明专利]一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法

权利要求书

1.一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）样品前处理

将待测样品按5g：10 mL的比例加入到提取液中，振荡、超声各4-6 min，4000-5000 r/min下离心4-6 min；取8-12mL水相上填充量为1000 mg的硅藻土柱后平衡5 min，然取10 mL乙腈过硅藻土柱，洗脱2-3次，收集洗脱液并加入0.5 mL二甲基亚砜，用乙腈定容至20 mL；取出10 mL，氮吹后用纯水定容至1.0 mL，过0.22 μm 滤膜，待分析；

（2）混合标准溶液组成和基质标准曲线制备

A．混合标准溶液组成：

混合标准溶液1包括：0.5 μg/mL肾上腺素、0.5 μg/mL 4-羟基-3-甲氧基-扁桃酸和1.0μg/mL 3,4-二羟基扁桃酸；混合标准溶液2包括：0.01 μg/mL异丙嗪、0.01 μg/mL阿托品、0.01 μg/mL山莨菪碱、0.01 μg/mL东莨菪碱、0.01 μg/mL普鲁卡因和0.01 μg/mL利多卡因；

B．基质标准曲线定量：

在空白样品中加入上述混合标准溶液1：0 μL，10 μL，20 μL，50 μL，100 μL，加入上述混合标准溶液2：5.0 μL，10 μL，50 μL，100 μL，以浓度为横坐标，仪器响应值为纵坐标，做基质加标标准曲线，作为试样处理液中待测物浓度定量的依据；

（3）色谱条件与质谱条件

A．色谱柱：Hypersil Gold C18，柱温40℃；流动相A：含有0.1%甲酸的水溶液；流动相B：乙腈溶液，梯度见下表1；进样量为10 μL，洗脱总时间为10 min，流动相流速为0.3 mL/min；

表1 正、负离子模式HPLC洗脱程序

；

B．质谱条件：质谱在正/负离子转换模式下进行全扫描测定，质量范围：m/z 100-500，分辨率70000，自动增益控制目标值5×10⁵；4-羟基-3-甲氧基-扁桃酸采用负离子模式2700V，其余成分则采用正离子模式3800 V，离子传输管温度为300 ℃，鞘气压35 arb，辅助气压10 arb，气化室温度350℃；二级采用自动触发模式，分辨率35000， 自动增益控制目标值2×10⁵，碰撞能量范围25%-40%，保留时间采集范围：根据色谱图中各个目标物质的保留时间值±1.0 min；

（4）浓度计算方法

样品中待测物的含量根据如下计算公式得到：X=2*C*V/m，式中：

X－试样中待测物含量，单位为μg/kg；

C－试样处理液中待测物浓度，根据基质标准曲线计算得到，单位为μg/L；

V— 定容体积，单位为mL；

m－试样质量，单位为g。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法，其特征在于步骤（1）中所述的提取液的配制方法如下：将草酸溶于水配制成浓度为8.6 g/L的草酸溶液，用氨水调pH至4.0。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法，其特征在于步骤（1）中取10mL水相上填充量为1000 mg的硅藻土柱。