[发明专利]一种甘露糖6-磷酸磷酸酶及甘露糖生物制备方法

权利要求书

1.一种体外多酶级联转化蔗糖制备甘露糖的方法，其特征为，甘露糖6-磷酸磷酸酶为氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示的蛋白，构建包含有蔗糖磷酸化酶，葡萄糖磷酸变位酶，葡萄糖磷酸异构酶，甘露糖6-磷酸异构酶，甘露糖6-磷酸磷酸酶，葡萄糖异构酶，葡萄糖激酶，聚磷酸激酶组成的多酶反应体系，转化蔗糖合成甘露糖；

所述蔗糖磷酸化酶来源于Bifidobacterium longum，基因在KEGG上的标号为BL0536，葡萄糖磷酸变位酶来源于Thermotoga maritima，基因在KEGG上的编号为TM0769；葡萄糖磷酸异构酶来源于Clostridium thermocellum，基因在KEGG上的编号为Cthe0217；甘露糖6-磷酸异构酶来源于Geobacillus thermodenitrificans，基因在Uniprot上的编号为GTNG_3398；甘露糖6-磷酸磷酸酶来源于Thermotoga maritima，基因在KEGG上的编号为TM0651；葡萄糖异构酶来源于Thermus thermophilus，基因在Uniprot上的编号为P26997；葡萄糖激酶来源于Thermobifida fusca，基因在KEGG上的标号为Tfu_1811；聚磷酸激酶来源于Thermus thermophilus，基因在KEGG上的编号为TT_C0637；

所述反应体系中，蔗糖的浓度为1-500g/L, 蔗糖磷酸化酶用量为0.1-1000U/mL，葡萄糖磷酸变位酶用量为0.1-1000U/mL，葡萄糖磷酸异构酶用量为0.1-1000U/mL，甘露糖6-磷酸异构酶用量为0.1-1000U/mL，甘露糖6-磷酸磷酸酶用量为0.1-1000U/mL，葡萄糖异构酶用量为0.1-1000U/mL，葡萄糖激酶用量为0.1-1000U/mL，聚磷酸激酶用量为0.1-1000U/mL；

酶催化的反应条件为10-80℃，反应时间为1-120小时。

2.一种体外多酶级联转化葡萄糖制备甘露糖的方法，其特征为，甘露糖6-磷酸磷酸酶为氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示的蛋白，构建包含有葡萄糖激酶，葡萄糖磷酸异构酶，甘露糖6-磷酸异构酶，甘露糖6-磷酸磷酸酶，聚磷酸激酶组成的多酶反应体系，转化葡萄糖合成甘露糖；

葡萄糖激酶来源于Thermobifida fusca，基因在KEGG上的标号为Tfu_1811；葡萄糖磷酸异构酶来源于Clostridium thermocellum，基因在KEGG上的编号为Cthe0217；甘露糖6-磷酸异构酶来源于Geobacillus thermodenitrificans，基因在Uniprot上的编号为GTNG_3398；甘露糖6-磷酸磷酸酶来源于Thermotoga maritima，基因在KEGG上的编号为TM0651；聚磷酸激酶来源于Thermus thermophilus，基因在KEGG上的编号为TT_C0637；

所述反应体系中，葡萄糖的浓度为1-500g/L,葡萄糖激酶用量为0.1-1000U/mL，葡萄糖磷酸异构酶用量为0.1-1000U/mL，甘露糖6-磷酸异构酶用量为0.1-1000U/mL，甘露糖6-磷酸磷酸酶用量为0.1-1000U/mL，聚磷酸激酶用量为0.1-1000U/mL；

酶催化的反应温度为10-80℃，反应时间为1-120小时。