[发明专利]一种免疫细胞冻存液及免疫细胞冻存方法在审
申请号: | 201910127851.5 | 申请日: | 2019-02-19 |
公开(公告)号: | CN109864064A | 公开(公告)日: | 2019-06-11 |
发明(设计)人: | 冷毅斌;吴亭 | 申请(专利权)人: | 武汉普诺赛生命科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人: | 王振宇 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路3*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 免疫细胞 冻存液 复苏 细胞 冻存 聚乙烯吡咯烷酮 免疫细胞表面 生物学特性 微生物检测 细胞稳定剂 羟乙基淀粉 葡萄糖 冷冻损伤 生理功能 细胞增殖 存活率 存活期 乙二醇 抗原 蔗糖 老化 损伤 保证 | ||
1.一种免疫细胞冻存液,其特征在于,包括DMSO、乙二醇、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉、葡萄糖、细胞稳定剂。
2.根据权利要求1所述的免疫细胞冻存液,其特征在于,每100mL冻存液中含DMSO6.4mL、羟乙基淀粉45.6mL和细胞稳定剂34mL。
3.根据权利要求1所述的免疫细胞冻存液,其特征在于,所述细胞稳定剂包括甘油和人血清蛋白。
4.根据权利要求2所述的免疫细胞冻存液,其特征在于,还包括甲基纤维素和磷酸缓冲盐溶液PBS。
5.一种免疫细胞冻存方法,其特征在于,包括:
基于免疫细胞冻存液调整细胞密度至2~5.5×105/mL,梯度降温至-80℃,放置20-30小时后移入液氮保存。
6.根据权利要求5所述的免疫细胞冻存方法,其特征在于,包括:
当温度不低于-25℃时,降温速率为-1~-2℃/min;当温度低于-25℃时,降温速率为-5℃~-10℃/min;当温度为-80℃时,浸入液氮;或置于-20℃冰箱2h,然后置于-80℃过夜后移入液氮保存。
7.根据权利要求5所述的免疫细胞冻存方法,其特征在于,所述细胞密度为5×105个/mL-5×106个/mL。
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