[发明专利]TRF2或其上调剂在制备治疗肌肉疾病的药物中的应用

说明书

本发明涉及TRF2或其上调剂在制备治疗肌肉疾病的药物中的应用。本发明发现，人骨骼肌TRF2蛋白水平与年龄呈负相关；人横纹肌中的TRF2随着有丝分裂细胞的老化而降低，与有丝分裂细胞相比，在分化的肌管中下调TRF2不会导致端粒去保护，而是触发有效的氧化应激，同时增加活性氧(ROS)、线粒体功能障碍、FOXO3a激活和自噬。因此TRF2或其上调剂可用于制备治疗相关肌肉疾病的药物，或用于筛选适合于治疗相关肌肉疾病的药物；检测TRF2蛋白或基因水平的试剂可用于制备检测个体的肌肉生理年龄的试剂或试剂盒。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，更具体地，涉及TRF2或其上调剂在制备治疗肌肉疾病的药物中的应用。

背景技术

端粒重复序列结合因子2(telomere repeat binding factor 2，TRF2)也被称为TERF2和TRBF2，在人类由TERF2基因编码，是一种在细胞周期中始终结合在端粒的蛋白质，为保卫端粒蛋白复合体(shelterin)的一个组分，它通过羧基端与端粒DNA结合，在维持端粒DNA结构稳定、防止染色体端-端融合、参与DNA损伤响应方面发挥着重要作用。

期刊文献《中华老年医学杂志》2014年第7期刊出的论文“小鼠大脑皮层端粒重复序列结合因子2的表达及神经元保护作用”，观察了小鼠大脑皮层TRF2表达的增龄性改变，探讨了TRF2基因转染对体外培养皮层神经元的保护作用及TRF2在神经元衰老中的作用。方法为：将C57BL/6J小鼠分为青年组(2月龄)和老年组(20月龄)，分别采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测小鼠大脑皮层TRF2表达；pcDNA-TRF2质粒转染孕18d胎鼠皮层神经元细胞，喜树碱作用16h，四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测神经元细胞存活率。结果表明：与2个月龄组小鼠比较，20个月龄组小鼠大脑皮层TRF2表达明显降低；喜树碱作用16h后，转染pcDNA-TRF2的神经元存活率为(75.4±2.6)％，明显高于与转染空载体质粒组(32.6±9.3)％(t＝22.85，P＜0.05)。因此得出结论：TFR2表达降低参与神经元衰老，TRF2过表达可能是治疗神经退行性变的新靶点。

期刊文献《中国当代医药》2012年第11期刊出的论文“端粒结合蛋白TRF1和TRF2表达水平在炎症性肠炎患者中的意义”，探讨了端粒结合蛋白TRF1和TRF2表达水平在炎症性肠炎患者中的意义。方法为：检测14例溃疡性结肠炎，13例克罗恩病患者体内TRF1和TRF2表达水平，并与正常人群比较。结果发现炎症性肠炎患者外周血TRF1和TRF2mRNA表达水平均下调。

期刊文献《Experimental Physiology》2012年第6期刊出的论文“Telomerelength and regulatory proteins in human skeletal muscle with and withoutongoing regenerative cycles”，评估了皮肌炎和多发性肌炎患者以及健康者体内端粒长度和参与端粒调节的特定蛋白质。具体地，在12名患者和13名健康者的骨骼肌样本中研究了平均和最小端粒长度以及端粒酶、端锚聚合酶1、TRF2和POT1的表达。结果发现与健康对照相比，患者的骨骼肌核部分的端粒酶、端锚聚合酶1、TRF2和POT1的表达水平分别高出六倍、七倍、三倍和五倍(P＜0.05)。这表明可能存在内源性机制，以使骨骼肌中端粒调节具有持续的变性和再生循环，并且存在一种模式，该模式中调控因子可能参与了骨骼肌的端粒保护。

虽然目前对于TRF2蛋白的结构、定位和功能等方面有了一定的了解，但是仍有很多问题需要进一步探讨和研究。例如TRF2在有丝分裂后的分化组织和细胞中的作用尚不明确。

骨骼肌占身体重量的40％，随年龄和健康状况而波动。骨骼肌主要由有丝分裂后、分化的多核细胞和包含更新潜力的静止卫星细胞组成。老化进程中，增殖细胞的耗竭，限制了肌肉再生或修复，导致肌肉减少症或年龄相关的肌肉萎缩，这是开启失独老人的第一原因。然而，对于老化肌肉的功能和结构的变化相关联的级联损伤事件仍然知之甚少。