[发明专利]一种适用于细胞样本流式检测的方法有效
申请号: | 201910131207.5 | 申请日: | 2019-02-22 |
公开(公告)号: | CN109765165B | 公开(公告)日: | 2021-06-04 |
发明(设计)人: | 余春 | 申请(专利权)人: | 英诺维尔智能科技(苏州)有限公司 |
主分类号: | G01N15/14 | 分类号: | G01N15/14 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 细胞 样本 检测 方法 | ||
本发明涉及细胞样本流式检测技术领域,尤其为一种适用于细胞样本流式检测的方法,采用细胞样本流式检测装置进行检测,装置包括流式仪主体;适用于细胞样本流式检测的方法包括以下步骤:第一步:在测试样本溶液中加入荧光抗体;第二步:加入荧光抗体的测试样本溶液进行孵化;第三步:加入过量的磁珠;第四步:进行磁珠孵化;第五步:测试管放置到强磁性样本安放座的上样位;第六步:流式仪主体进行上样测试。本发明中配合自动化系统,进行大规模荧光抗体流式检测,便于与自动化系统中的自动加液等模块进行匹配。
技术领域
本发明涉及细胞样本流式检测技术领域,具体为一种适用于细胞样本流式检测的方法。
背景技术
细胞治疗与应用已逐步进入规模化应用阶段,伴随大规模生产的需求,批量高效率的细胞质量检测同时成为必须,流式检测为细胞检测过程中的主要手段,配合荧光抗体可有效检测多种类型标志物,但为了获得较高的检测准确率,在进行实际的检测操作前,需进行多次的离心、吹打重悬,以去除残留的未与细胞有效结合的荧光抗体,因为需要多次的离心、吹打重悬并配合目标液体的提取,现有手工操作效率难以满足大规模检测的需求,如在自动化设备中完成复杂的离心、吹打等工作,也会严重影响系统的执行效率,并大幅度提高系统的复杂度,需要一种简单高效的方式,在进行流式荧光检测时,高效地去除样本溶液中残留的荧光抗体,去除过程中的噪声,以便获得准确的检测结果,因此需要一种适用于细胞样本流式检测的方法对上述问题做出改善。
发明内容
本发明的目的在于提供一种适用于细胞样本流式检测的方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种适用于细胞样本流式检测的方法,采用细胞样本流式检测装置进行检测,装置包括流式仪主体,所述流式仪主体一侧设有流式上样管路,所述流式上样管路远离流式仪主体的一端设有测试管,所述测试管内设有测试样本溶液,所述测试管外部设有强磁性样本安放座;
适用于细胞样本流式检测的方法包括以下步骤:
第一步:在测试样本溶液中加入荧光抗体;
第二步:加入荧光抗体的测试样本溶液进行孵化,保障目标细胞表面抗原与荧光抗体有效结合,形成细胞吸附结合体,所述细胞吸附结合体包含荧光抗体、目标细胞和目标细胞表面抗原,且所述目标细胞表面设有目标细胞表面抗原,所述目标细胞表面抗原远离目标细胞的一端固定连接有荧光抗体;
第三步:加入过量的磁珠;
第四步:进行磁珠孵化,形成磁珠吸附结合体,所述磁珠吸附结合体包含磁珠表面抗原、荧光、磁珠、结合点和荧光抗体,且所述磁珠表面设有磁珠表面抗原,所述磁珠表面抗原远离磁珠的一侧通过结合点固定连接有荧光抗体,微米级的磁珠上结合磁珠表面抗原,模拟目标细胞表面抗原与多余的荧光抗体结合;
第五步:测试管放置到强磁性样本安放座的上样位;
第六步:流式仪主体进行上样测试,在流式上样时,目标细胞表面抗原与荧光抗体的结合形成的细胞吸附结合体正常通过流式上样管路进入流式仪主体的液路系统进行检测,磁珠表面抗原和多余的荧光抗体结合形成的磁珠吸附结合体由于磁力的作用,留在测试管的容器壁上,不进入流式仪主体的液路系统,在提取完细胞吸附结合体后,测试管即可废弃,不再需要任何的后续工作。
优选的,所述荧光抗体和磁珠表面抗原通过孵化结合。
优选的,所述荧光抗体和目标细胞表面抗原通过孵化结合。
优选的,所述磁珠吸附结合体和强磁性样本安放座通过磁力吸附。
优选的,所述磁珠计量采用过量投入,所述磁珠采用微米级磁珠。
优选的,所述流式上样管路的一端置于测试管内部下部。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
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