[发明专利]一种基于HPLC多波长叠加的党参多组分含量测定方法在审
申请号: | 201910134096.3 | 申请日: | 2019-02-22 |
公开(公告)号: | CN109839459A | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 吴发明;刘付松;王道清;刘莎;陈翠莎 | 申请(专利权)人: | 遵义医学院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 黄书凯 |
地址: | 563000 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 乙腈 体积比 组分含量测定 多波长 流动相 党参 叠加 高效液相色谱法 梯度洗脱程序 白术内酯Ⅰ 一次性测定 白术内酯 党参炔苷 同一系统 中药检测 对照品 白术 丁香 节约 | ||
1.一种基于HPLC多波长叠加的党参多组分含量测定方法,其特征在于:包括的步骤为:
步骤一、设定色谱条件:流速为0.8mL/min,色谱柱的柱温为30℃,检测波长为220nm、267nm、276nm,以乙腈为流动相A,水为流动相B,梯度洗脱程序为:0~3min,乙腈与水的体积比为96.5:3.5;3~20min,乙腈与水的体积比为96.5:3.5~86:14;20~35min,乙腈与水的体积比为86:14~77:23;35~60min,乙腈与水的体积比为77:23~28:72;60~76min,乙腈与水的体积比为28:72~5:95;76~80min,乙腈与水的体积比为5:95;
步骤二、对照品溶液的制备:取标准品党参炔苷、丁香苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内脂Ⅲ,分别加30%甲醇溶解,制成党参炔苷对照品溶液、丁香苷对照品溶液、白术内酯Ⅰ对照品溶液、白术内酯Ⅱ对照品溶液和白术内脂Ⅲ对照品溶液;
步骤三、样品溶液的制备:取党参粉末1g,置于广口瓶中,加入30%甲醇30ml,称定重量,进行超声提取后冷藏,再次称重,用30%甲醇补足减失的重量,0.45μm微孔滤膜过滤得样品溶液;
步骤四、高效液相色谱法测定:分别吸取对照品溶液与样品溶液各20μL,注入高效液相色谱仪,用220nm、267nm、和276nm三个检测波长叠加测定,记录色谱图,通过计算得到党参炔苷、丁香苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内脂Ⅲ的含量。
2.根据权利要求1所述的一种基于HPLC多波长叠加的党参多组分含量测定方法,其特征在于:步骤一中所述色谱条件中色谱柱选用Inertsil ODS~3。
3.根据权利要求2所述的一种基于HPLC多波长叠加的党参多组分含量测定方法,其特征在于:步骤二中所述党参炔苷对照品溶液的浓度为886μg/mL,所述丁香苷对照品溶液的浓度为130μg/mL,所述白术内酯Ⅰ对照品溶液的浓度为89.6μg/mL,所述白术内酯Ⅱ对照品溶液的浓度为50.5μg/mL,所述白术内脂Ⅲ对照品溶液的浓度为614μg/mL。
4.根据权利要求3所述的一种基于HPLC多波长叠加的党参多组分含量测定方法,其特征在于:步骤三中所述超声提取时间为28~32min,冷藏时间为4.5~5.5min。
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