[发明专利]糖化蛋白质试验

说明书

描述了用于进行血红蛋白A1c、糖化白蛋白和其他糖化蛋白质的试验的方法、装置和试剂。该方法包括确定糖化蛋白质与未糖化蛋白质之间的比率。在一些应用中，试验采用LOCI用于信号生成。本发明涉及用于检测糖化蛋白质，尤其包括糖化血红蛋白的试验和相应装置及试剂。通常理解所述检测用于控制糖尿病患者的血糖水平和监测前期糖尿病个体的状态。

相关申请的交叉参考

本申请要求2014年3月20日提交的美国临时专利申请号61/968,297的优先权，该文通过引用纳入本文。

发明领域

本发明涉及糖化蛋白质试验。

发明背景

提供以下说明仅仅辅助阅读者理解，并且并不承认本文公开或参考的任意信息构成本发明的现有技术。

对糖尿病患者中血糖浓度的控制已经显示降低疾病的长期微血管和神经并发症的频率和严重程度。已经发现糖化血红蛋白形成的速率与血液中的葡萄糖浓度直接相关。结果，在对葡萄糖水平的监控中，利用对糖化血红蛋白的检测来确定血糖浓度在延长的时间段内已被控制的程度。

一般而言，血红细胞的平均寿命是约90-120天。因此，血红蛋白的糖化百分比的确定与这段时间期间，并且尤其是在之前的2-3个月中的平均葡萄糖浓度相关。因此，糖化血红蛋白的百分比是这段时间中血糖控制的指标。

血红蛋白变体，如HbS、HbC、HbD、HbE，可能具有较短的平均寿命和不同的糖化率并且可能对％HbA1C与平均葡萄糖浓度的相关性有影响，因此影响HbA1C结果的临床价值。

知晓常见变体是否存在，尤其在筛选环境中，是评价血糖控制时的重要因素。

已经发现葡萄糖粘附于血液中的非血红蛋白蛋白质，例如，丰富蛋白质，白蛋白。由于白蛋白的循环半衰期为约20天，糖化白蛋白的浓度(或比率)是对之前2-3周中的平均葡萄糖浓度的度量。

一些用于确定糖化蛋白质的浓度或百分比的方法已经使用与糖化蛋白质的糖的1，2顺二醇结合的二羟基硼基化合物来使它们与非糖化蛋白质分离。这类方法包括美国专利号4,269,605、5,284,777、5,110,745、4,861,728、PCT申请WO 96/03657、和PCT申请WO9840750中所述的那些方法，其通过引用全文纳入本文。

发明内容

本发明涉及用于检测糖化蛋白质，尤其是包括糖化血红蛋白的试验和相应装置以及试剂。如一般理解，这种检测可用于控制糖尿病患者的血糖水平，并且用于监控前期糖尿病(pre-diabetic)个体。本文描述了提供适用于多种环境，包括医疗点环境中的快速、高精度试验的试验。

本发明描述了用于对血红蛋白A1C(即，糖化血红蛋白)进行精确和准确定量的试验模式。另外，在一些实施方式中，这种多重试验将检测在测试的样品中是否存在常见变体。在一些实施方式中，试验通过分别测量血红蛋白A1C和总血红蛋白并取得这两个结果的比率提供了血红蛋白A1C百分比的定量结果。可定量、半定量或定性检测常见血红蛋白变体HbS、HbC、HbD和HbE。如本文所述，血红蛋白变体结果可合并或分开表达，从而提供了各种变体的存在或量。这种检测可用于筛选糖尿病患者并用于监测糖尿病个体的状态。本文描述了提供适用于多种环境，包括医疗点环境中的快速、高精度试验的试验。

本发明的第一方面涉及一种确定样品中糖化蛋白质的分数的方法。该方法包括使(i)标记的特异性结合成员，其对总蛋白质或对应于总蛋白质(即，糖化或未糖化形式的特定蛋白质的总量，例如，糖化或未糖化血红蛋白的总量)的肽有特异性或对未糖化蛋白质或肽有特异性，和(ii)标记的特异性结合成员，其对糖化蛋白质(例如，血红蛋白A1c)或肽有特异性，与以下物质接触：

a.含有易于糖化的所述蛋白质或蛋白质的肽的样品；和