[发明专利]一种靶向呼吸道黏膜的递呈载体复合物及应用

说明书

本发明提供一种靶向动物呼吸道黏膜的递呈载体复合物及其应用。所述递呈载体复合物为适量质量的递呈载体脱乙酰壳聚糖和适量质量的佐剂破伤风类毒素混合制成。所述递呈载体复合物可以与免疫原一起用于生产预防相对应的动物疾病的疫苗。解决了靶向动物呼吸道黏膜的免疫复合物疫苗缺乏有效的递呈载体问题，提高了靶向动物呼吸道黏膜免疫制品的递呈效率，增强了呼吸道黏膜免疫反应。该发明技术的应用可有效保障动物健康，抵抗主要通过呼吸道黏膜感染的动物疾病，提高养殖业的经济效益。

技术领域

本发明涉及动物生物制剂技术领域，具体涉及到靶向动物呼吸道黏膜系统的递呈载体复合物的制备方法，尤其涉及一种靶向呼吸道粘膜免疫的递呈载体复合物及其应用。

背景技术

目前针对主要通过动物呼吸道感染的病原微生物的免疫制品有活疫苗，如预防禽类、猪、牛等动物支原体感染的疫苗，禽类的新城疫苗、传染性支气管炎疫苗等，这类疫苗特点是可以通过黏膜免疫诱导动物产生黏膜免疫和全身免疫反应，从而保护动物不受相应外来病原感染。然而，一些影响动物健康的病原微生物如流感病毒、口蹄疫病毒等无活弱毒疫苗，这使得针对通过呼吸道感染的病原如流感病毒的防控缺少黏膜免疫屏障——缺乏黏膜抵抗力。其表现在生产实践中的结果就是尽管使用了灭活疫苗防疫过动物，诱导动物产生体液免疫，但动物的第一道黏膜屏障是开放的，病原仍可感染，并在动物的上呼吸道黏膜繁殖，不能及时被清除，在应激条件下动物群仍能发生流感，从而给饲养者造成严重经济损失。这表明生产上需要针对预防呼吸道黏膜感染的致病微生物的生物制品或者免疫制品。

其次，目前一些靶向黏膜载体的技术已经常见。一些化学分子如脂质体、壳聚糖、藻酸盐等载体以及一些生物的一部分如细菌分泌的：霍乱毒素、大肠杆菌毒素、破伤风类毒素等，可作为佐剂应用于疫苗。其能克服胞外障碍的限制，保护免疫原不被胞外核酸酶降解，起到佐剂作用，促使动物的免疫细胞募集和活化，提高机体的免疫应答水平。其中有些物质如脂质体、壳聚糖等是递呈载体，起到一定程度的是递呈运输作用，进一步增强动物机体的黏膜免疫。也有其用于一些生物制品的技术或者报道。还有一些微生物其被改造后可作为载体，如沙门菌、乳酸菌、腺病毒等。这些载体和佐剂有的已经用于生产实际，但亟需使用递呈载体复合佐剂载体后，再与免疫原(如流感病毒)结合而制成的针对动物黏膜免疫的疫苗或者免疫复合物技术。换言之生产上缺乏相应的靶向黏膜免疫的递呈载体和佐剂复合物。

本发明技术针对此，采用(对动物无毒害作用，可与动物黏膜有效接触，使其所带的外源物质充分与动物黏膜表面的细胞接触，诱导有效的免疫反应的)递呈载体壳聚糖复合佐剂破伤风类毒素(具有较好的佐剂性质)，形成佐剂递呈载体复合物，以弥补生产上缺乏靶向动物呼吸道黏膜免疫的制品制备技术的不足。

本发明技术，可以与免疫原(如经筛选灭活的H9N2流感病毒)有效组合，形成靶向黏膜的免疫复合物疫苗。该疫苗可通过滴鼻、甚至喷雾方式用于动物，提高动物的黏膜抵抗力，可以有效预防针对通过呼吸道黏膜感染的动物疫病，降低这些疾病的发病率，保障动物健康，增加经济效益。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过靶向动物呼吸道黏膜免疫的递呈载体复合物，以解决现有技术中无很好的、针对动物黏膜免疫的复合物的问题，从而为研制靶向呼吸道黏膜的疫苗递呈载体提供技术支持。这将有效保障动物健康，提高养殖业的经济效益。

本发明提供的一种靶向呼吸道黏膜的递呈载体复合物，包括已经筛选的佐剂、递呈载体配比；

所述递呈载体复合物为适量质量的递呈载体脱乙酰壳聚糖和适量质量的佐剂破伤风类毒素溶解于磷酸盐缓冲液，使用时以一定比例混合制成。

所述递呈载体复合物可以与免疫原复合生产预防相对应的动物疾病。使用时，将一定质量的佐剂破伤风类毒素，一定质量的递呈载体脱乙酰壳聚糖，一定量的所述免疫原，混合均匀，加入冻干保护剂和防腐剂而制成的靶向动物呼吸道黏膜的递呈载体免疫复合物疫苗，即可使用。

具体实施方式