[发明专利]一株产低温葡萄糖氧化酶的担子菌

说明书

本发明涉及一种微生物筛选及发酵领域，具体涉及一株产低温葡萄糖氧化酶的野生酵母菌株担子菌(Basidioascus sp.)WYQ 23菌株，该菌株于2019年1月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏中心登记入册编号：CGMCC No.17180。本发明提供的担子菌WYQ 23菌株遗传稳定性良好，能稳定的保持其产低温葡萄糖氧化酶的优良性状，制备出的葡萄糖氧化酶纯化容易，在低温下具有良好的酶活活性，在食品、饲料、医疗等行业有广泛的应用前景，经济和社会效益显著。

技术领域

本发明涉及一种微生物筛选及发酵领域，具体涉及一种野生酵母菌株担子菌。

背景技术

葡萄糖氧化酶是需氧脱氢酶，利用氧作为电子受体，专一性地将葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，在此过程中葡萄糖氧化酶起到了去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用。由于其天然无毒副作用及其独特的脱氧效果而产生的保鲜作用被广泛地用于食品加工领域。

目前葡萄糖氧化酶的工业化生产菌株主要为陆地来源的霉菌，其培养温度较高，表达量较低，杂蛋白较多，造成分离纯化困难，生产成本高且无法直接应用于食品领域。海洋来源的低温葡萄糖氧化酶研究相对较少，野生非转基因酵母生产菌株更是鲜有报道。目前我国生产的葡萄糖氧化酶工业酶制剂纯度普遍较低，长期以来依赖进口，因此寻找葡萄糖氧化酶进口酶制剂的替代产品具有重要现实意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种从海洋资源中分离低温葡萄糖氧化酶的菌株及其应用。

一株产低温葡萄糖氧化酶的野生酵母菌株担子菌(Basidioascus sp.)WYQ 23菌株，该菌株于2019年1月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏中心登记入册编号：CGMCC No.17180。

将得到的该菌序列在NCBI上进行比对，查找同源性最高的已知序列菌株，经对比，该菌株与Basidioascus sp.相似度最高，达99％。该菌株ITS区序列已申请GenBank号，为SUB4615397 Seq1 MK038973。

WYQ 23菌株从大连渤海海域的海泥(经度121.662527，纬度38.861911)取样用显色筛选固体培养基进行筛选。

显色筛选固体培养基：葡萄糖60-80g/L，蛋白胨3-4g/L，KH₂PO₄ 2-3g/L，MgSO₄0.5-0.7g/L，KCl 0.5-0.7g/L，NaNO₃ 3-4g/L，CaCO₃ 3-4g/L，可溶性淀粉8-10g/L，脱氧胆酸钠0.2-0.3g/L，海水配制，pH自然，121℃灭菌20min。

WYQ 23菌株具有下述特性：

1.菌落形态学特征

将产低温葡萄糖氧化酶的野生酵母菌株担子菌(Basidioascus sp.)WYQ 23菌株置于YPD固体培养基上于25℃培养生长，3-7天后得到直径约为4-10mm的褐色菌落，菌落呈圆形，扁平，较不透明，表面较光滑，正面与反面以及边缘与中央部位的颜色较一致。

2.菌株形态学特征

本发明的WYQ 23菌株显微镜下呈卵圆形，与酵母菌镜下形态一致。

3.生理与生化特性

本发明的WYQ 23菌株培养温度为20-25℃，最适生长温度为25℃，且在pH5.6的条件下生长良好。

4.该WYQ 23菌株ITS区具有如SEQ ID：1所示的核苷酸序列。