[发明专利]一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法在审

专利信息
申请号: 201910139044.5 申请日: 2019-02-25
公开(公告)号: CN109699496A 公开(公告)日: 2019-05-03
发明(设计)人: 江爱明;柯尊伟;巩建华;潘坤;蔡高磊;纪昌武;李润龙 申请(专利权)人: 汉江师范学院;十堰半夏生物技术有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 西安研创天下知识产权代理事务所(普通合伙) 61239 代理人: 杨凤娟
地址: 442000 *** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 离体块茎 半夏 丛生芽诱导 快速繁殖 诱导培养 丛生芽诱导培养基 外植体消毒 种质资源 培养基 丛生芽 蔗糖 灭菌 琼脂 移栽 成活 诱导 种植 环节
【权利要求书】:

1.一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法,其特征在于方法步骤如下:(1)取荆半夏块茎作为外植体,经消毒灭菌后接种于培养基中,培养条件:温度25±1℃,光照强度1000~2000Lx,光照时间:10~12h/d,诱导荆半夏的块茎产生大量的丛生芽。

(2)半夏丛生芽生长到2cm左右后切去周围组织,接种于含有多效唑的培养基,培养条件:温度25±1℃,光照强度2000Lx,光照时间:10~12h/d。30天后形成0.8cm离体块茎。取出离体块茎,消毒清洗后,移栽至基质培养土中。

2.根据权利要求1所述的一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法,其特征在于:所述培养基为MS培养基,蔗糖的添加量为30g/L,琼脂的添加量为8.6g/L,6-BA的添加量为0.4~1.0mg/L,NAA的添加量为0.05mg/L,多效唑的添加量为0.6mg/L,AC的添加量为0.05g/L,pH值为5.8。

3.根据权利要求1所述的一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法,其特征在于:所述块茎标准直径为0.8cm。

4.一种根据权利要求1所述的荆半夏组织培养繁殖的方法,其特征在于:其特征在于按如下的步骤进行:

(1)以荆半夏块茎作为外植体,对荆半夏外植体的消毒灭菌;

(2)将步骤(1)的块茎切割成5mm×5mm小块,接入MS添加6-BA和NAA的培养基上,在25±1℃,1000~2000Lx光照强度下培养30天,可萌发出丛生芽;

(3)将步骤(2)中萌发出的丛生芽切成单芽,接入MS添加6-BA、多效唑和活性炭的培养基上,在25±1℃,2000Lx光照强度下培养30天,待离体块茎的直径达到0.8cm时进行大田移栽;

(4)将步骤(3)中经过倒苗的荆半夏离体块茎从培养平中取出,清洗两次,并用多菌灵浸泡10min后,移栽至基质培养土中即可。

5.根据权利要求4所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法,其特征在于:步骤(1)消毒灭菌具体为:先采用75%酒精处理30s,然后用无菌水冲洗3~4次,再用0.1%升汞消毒,同时滴加3~4滴Tween-80,7分钟后用无菌水冲洗6~8次;最后用医用头孢拉定溶液浸泡5min,再用无菌水冲洗3~4次待用。

6.根据权利要求5所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法,其特征在于:步骤(2)中MS培养基中6-BA的浓度为1.0mg/L,NAA的浓度为0.05mg/L,蔗糖的浓度为30g/L,琼脂的浓度为8.6g/L,光照强度为1000~2000Lx,光周期12h/d下。

7.根据权利要求6所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法,其特征在于:步骤(3)中MS培养基中的6-BA浓度为为0.5mg/L,多效唑的浓度为0.6mg/L,活性炭的浓度为0.05g/L,蔗糖的浓度为30g/L,琼脂的浓度为8.6g/L,光照强度为2000Lx,光周期12h/d下。

8.根据权利要求7所述的一种荆半夏组织培养繁殖的方法,其特征在于:步骤(4)中基质培养土的基质是由珍珠岩、蛭石、腐殖土按体积比为1:1:0.5配制。

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