[发明专利]用于检测鳜鱼弹状病毒的试剂盒

说明书

本发明公开了用于检测鳜鱼弹状病毒的试剂盒，属于生物诊断技术领域，本发明试剂盒包括捕获抗体(4H81F11抗体)和检测抗体(生物素标记的4E121F3抗体)，捕获抗体和检测抗体均能良好识别SCRV病毒，4H81F11抗体和4E121F3抗体具有不同的表位，在此基础上，建立了一种用于检测SCRV病毒的双抗体夹心ELISA法。

技术领域

本发明属于生物诊断技术领域，尤其涉及用于检测鳜鱼弹状病毒的试剂盒。

背景技术

鳜鱼弹状病毒病是由鳜鱼弹状病毒(Siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV) 引起并对鳜鱼(Siniperca chuatsi)有高危影响。鳜鱼弹状病毒病发病迅速且死亡率高，严重影响我国鳜鱼养殖业。鳜鱼弹状病毒是弹状病毒(rhabdoviruses) 中的一种，弹状病毒是一类有包膜且不分节的单股负链RNA病毒。目前国际病毒分类委员会(InternationalCommittee on Taxonomy of Viruses,ICTV)将弹状病毒分为18个属，但还有一些尚未分类[1]。第一株鱼类弹状病毒是1962年由丹麦的Jensen等从患病虹鳟鱼体中分离得到[2]，现在已知的鱼类弹状病毒有二十多种。

弹状病毒有五种蛋白，分别为N、P、M、G、L，它们依次编码核蛋白 (nucleoprotein,N)，磷酸化蛋白(P)，M蛋白(matrix protein,M)，糖蛋白 (glycoprotein,G)，RNA依赖的RNA聚合酶蛋白(RNA-dependent RNA polymer rase protein,L)。其中，G蛋白是编码抗原的主要蛋白，可以激发宿主细胞产生免疫应答并产生抗体，G蛋白也与病毒毒力相关。

然而，现在尚没有用于检测鳜鱼弹状病毒的试剂盒。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术存在的不足，而提供用于检测鳜鱼弹状病毒的试剂盒，该试剂盒包括捕获抗体和检测抗体，采用双抗体夹心ELISA法进行定量检测鳜鱼病毒。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种用于分泌鳜鱼弹状病毒抗体的杂交瘤细胞株，其命名为弹状病毒单抗细胞株4H81F11，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏时间为2019年1 月8日，保藏编号为CCTCC NO:C201917。

另外，本发明还提供一种用于分泌鳜鱼弹状病毒抗体的杂交瘤细胞株，其命名为弹状病毒单抗细胞株4E121F3，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏时间为2019年1月8日，保藏编号为CCTCC NO:C201918。

另外，本发明还提供一种鳜鱼弹状病毒的捕获抗体，所述捕获抗体由弹状病毒单抗细胞株4H81F11分泌，弹状病毒单抗细胞株4H81F11已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏时间为2019年1月8 日，保藏编号为CCTCC NO:C201917。

另外，本发明还提供一种鳜鱼弹状病毒的检测抗体，所述检测抗体由弹状病毒单抗细胞株4E121F3分泌，弹状病毒单抗细胞株4E121F3已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏时间为2019年1月8 日，保藏编号为CCTCC NO:C201918。

另外，本发明还提供一种用于检测鳜鱼弹状病毒的试剂盒，其包括所述的捕获抗体和所述的检测抗体。

作为上述技术方案的改进，所述试剂盒还包括亲和素标记的酶和底物，所述捕获抗体包被在Elisa孔板中，所述检测抗体标记有生物素。

作为上述技术方案的进一步改进，所述试剂盒还包括用于稀释鳜鱼弹状病毒的样品稀释液、封闭液、洗涤液、终止液、阴性对照品和阳性对照品，所述封闭液为2％BSA。

作为上述技术方案的更进一步改进，亲和素标记有辣根过氧化酶。