[发明专利]表达载体在棉花的次生壁发育期特异表达GhPSY2基因生产棕黄色纤维中的应用

说明书

本发明提供了表达载体在棉花的次生壁发育期特异表达GhPSY2基因生产棕黄色纤维中的应用，涉及棉花育种技术领域，将所述GhPSY2基因的序列和启动子Fbl2A的序列插入载体pLGN中得到表达载体。Fbl2A‑GhPSY2转基因棉花在棉花的次生壁发育期特异性表达GhPSY2基因，使得成熟纤维呈现棕黄色，且成熟纤维中类胡萝卜素水平显著升高。这些结果表明，通过在棉花中导入Fbl2A‑GhPSY2转基因可以促进GhPSY2基因在纤维中表达，提高成熟纤维类胡萝卜素水平，使成熟纤维着色。

技术领域

本发明涉及棉花育种技术领域，具体涉及表达载体在棉花的次生壁发育期特异表达GhPSY2基因生产棕黄色纤维中的应用。

背景技术

彩色棉又称有色棉，是能在纤维发育过程中合成和沉积天然色素，从而使成熟棉纤维带有天然色彩的棉花。与常规白色棉和化学纤维相比，彩色棉纤维本身具有天然色泽，在纺织加工过程中不需要漂白、印染等化学处理，可以避免染料、有机溶剂、重金属等有毒有害残留物对纺织品的污染和人体的危害，降低纺织业的能耗水耗，节约纺织加工的成本。彩色棉的发展具有巨大的社会效益与经济效益。

在天然棉花材料中，目前只有绿色和棕色棉可用于现代纺织。拓展成熟纤维的呈色色素和色彩范围，将有力促进彩色棉在纺织行业的推广应用，具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供表达载体在棉花的次生壁发育期特异表达 GhPSY2基因生产棕黄色纤维中的应用，将表达载体转化到棉花植株中，在棉花的次生壁发育期特异性表达GhPSY2基因，使得棉花成熟纤维呈现棕黄色，而且成熟纤维中类胡萝卜素含量显著提高。

本发明提供了表达载体在棉花的次生壁发育期特异表达GhPSY2基因生产棕黄色纤维中的应用；

将所述GhPSY2基因的序列和启动子Fbl2A的序列插入载体pLGN中得到表达载体。

优选的，所述GhPSY2基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

优选的，所述启动子Fbl2A具有SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。

优选的，所述载体pLGN的构建方法包括：将植物表达载体pBI121的 T-DNA区段替换为了组成型的2×35S启动子控制的报告基因GUS和标记基因NPTII的融合基因表达盒，以及另一个由35S-P控制的表达盒。

优选的，所述载体pLGN具有SEQ ID No.12所示的核苷酸序列。

优选的，将所述载体pLGN经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切，得到酶切载体，将所述启动子Fbl2A的序列经BamHⅠ和HindⅢ双酶切，得到酶切启动子，将所述GhPSY2基因的序列经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切，得到酶切序列，将所述酶切启动子和酶切序列插入到酶切载体中，得到表达载体。

本发明提供了表达载体在棉花的次生壁发育期特异表达GhPSY2基因生产棕黄色纤维中的应用，将表达载体转化到棉花植株中，在棉花的次生壁发育期特异性表达GhPSY2基因，使得棉花成熟纤维呈现棕黄色，而且成熟纤维中类胡萝卜素含量显著提高。

附图说明

图1为Fbl2A-GhPSY2的表达载体T-DNA区的基因结构图，其中，2 ×35S-P，串联两个增强子的花椰菜花叶病毒35S启动子；GhPSY2，棉花八氢番茄红素合成酶基因；GUS:NPTII，β-葡萄糖酸苷酶与新霉素磷酸转移酶融合基因；Nos-T，农杆菌冠瘿碱合成酶基因终止子；Fbl2A，棉花纤维次生壁合成期特异启动子；

图2为纤维特异表达载体Fbl2A-GhPSY2的构建流程；