[发明专利]一种长碳链二元酸生物发酵制备方法

权利要求书

1.一种长碳链二元酸生物发酵制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

A、以C9-C18的烷烃、脂肪酸或其酯为底物，以热带假丝酵母作为菌株，通过发酵将底物转化为相应的长碳链二元酸，其中培养基的基底配方为：酵母膏：0.3%-1.5%、蔗糖：2.5%-4%、乳化剂：0.003%-0.07%、：1.2%-2.5%、KCl：1%-2%、NaCl:0.25%-0.4%、消泡剂：0.02%-0.07%、尿素0.1%-1.5%；

反应条件为：菌株接种量10%-20%、发酵罐温度：28℃-32℃、发酵罐罐压:0.06-0.1MPa、通风量为1:0.1-0.5vvm、培养时间为130-150h、pH值：发酵前期菌体生长4.5-5.5，发酵中后期转化6.0-7.5；

补料参数控制：当菌体生长浓度（）大于0.9时向反应罐内补加相应的烷烃、脂肪酸或其酯，控制发酵液中烷烃、脂肪酸或其酯的浓度为3%-5%，发酵结束前24小时停止补料；

B、将发酵液静置1-3h；再通过离心法或过滤膜过滤得到二元酸清液；

C、通过蒸汽加热器将步骤B产生的二元酸清液加热到75-95℃，同时加碱调节二元酸清液的pH值至7.5-9.5，再将上述二元酸清液转移至脱色罐中保温，同时向脱色罐中加入二元酸清液体积0.1%-2%的活性炭脱色处理60-150min；

D、将步骤C的二元酸清液过滤得到二元酸脱色液，向上述二元酸脱色液中加入酸液调节pH值至2-4，并在60-105℃环境下结晶1-3h，再降温至25-45℃后保温1-2h待物料完全结晶后得到二元酸结晶液，再通过板框过滤器过滤得到二元酸湿品，并经干燥后得到二元酸粗品；

E、将步骤D得到的二元酸粗品投入到脱色罐中，向脱色罐中加入有机溶剂溶解二元酸粗品，待二元酸完全溶解后向脱色罐中加入溶液体积0.2%-5%的活性炭，并在70-95℃环境下脱色处理120-180min后通过板框压力机过滤得到二元酸成品清液；

F、将步骤E得到的二元酸成品清液加入到一次结晶罐中，降温至65-75℃后保温0.5-1.5h后再降温至15-25℃后保温1.5-3h待完全结晶后通过离心机分离得到二元酸结晶体；

G、将步骤F得到的二元酸结晶体加入到高温结晶罐中，并向罐体内加入高温水至90-130℃，保温1-2h后再降温至25-35℃，待完全结晶后通过离心分离机分离及闪蒸干燥器干燥后得到二元酸成品。

2.根据权利要求1所述的一种长碳链二元酸生物发酵制备方法，其特征在于：所述步骤C中碱液为氢氧化钠或氢氧化钾。

3.根据权利要求1所述的一种长碳链二元酸生物发酵制备方法，其特征在于：所述步骤D中酸液为乙酸、硫酸、硝酸或盐酸。

4.根据权利要求1所述的一种长碳链二元酸生物发酵制备方法，其特征在于：所述步骤E中100%的有机溶剂与二元酸的质量比为4-2:1。

5.根据权利要求1所述的一种长碳链二元酸生物发酵制备方法，其特征在于：所述步骤E中的有机溶剂为醋酸。