[发明专利]miR-145-3p在制备细胞凋亡与自噬增强剂中的应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，本发明选择多发性骨髓瘤患者外周血浆中进行microRNAs表达谱的分析，并利用qPCR技术验证，相对于在正常健康人群，在多发性骨髓瘤患者外周血浆中miR‑145‑3p的表达水平显著降低。本发明又通过miR‑145‑3p过表达、miR‑145‑3p沉默，观察细胞凋亡与自噬的水平，结果发现，miR‑145‑3p能够促进细胞凋亡与自噬。本发明为诊断多发性骨髓瘤疾病提供了新的血清学标识物；也为多发性骨髓瘤疾病的防治提供了新的靶点。

本申请是2016年9月23日提交的专利申请号为201610845836.0，发明名称为“miR-145-3p在制备预防或治疗多发性骨髓瘤疾病药物中的应用”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，更具体地讲，涉及miR-145-3p及其类似物的临床应用。

背景技术

MicroRNA是近年来在果蝇、线虫、小鼠和人等多种生命体中被发现的一类具有转录后调节活性的小分子RNA。这一内源性的小分子RNA的大量发现得益于两种技术，一种是microRNA cDNA文库的构建和测序技术；另一种是生物素标记的寡核苷酸探针捕获，通过接头引物进行PCR扩增的技术。通过文库的构建和测序，人们掌握了microRNA的大量序列信息，通过对这些序列进行生物信息学比对分析，人们发现大部分microRNA在物种间高度保守，在进化上高度同源。

生物信息学分析发现一个microRNA可能直接调控上百个基因的表达，进而调控了许多重要的细胞途径和生理病理过程。例如:MicroRNAs能够调控细胞的分裂、分化、增殖、凋亡和自噬；胚胎的发育,机体的能量代谢、激素分泌和造血功能等生理过程；肿瘤发生、迁移、侵袭等病理过程。在血液系统中，microRNAs参与了异常外周血及骨髓性疾病的发生过程。MicroRNAs表达的紊乱，参与多种血液系统恶性疾病的发生过程。

MicroRNAs在血液细胞凋亡与自噬中的功能研究有助于我们更好的理解其发病机理，进一步找到血液系统相关(尤其是多发性骨髓瘤,此外还包括淋巴瘤、意义未明的单克隆免疫球蛋白血症等)的药物靶点，从而为这类疾病的预防或治疗提供行之有效的途径。

诱导细胞凋亡是药物发挥重要的作用之一，在线粒体介导的细胞凋亡中，细胞色素c和线粒体蛋白Smac释放出来，还可与调亡蛋白酶活化因子(apoptotic proteaseactivating facter-1,Apaf-1)结合形成多聚复合物，并与Caspase9结合形成凋亡小体，激活Caspase3等级联反应，引起细胞凋亡。除了线粒体介导的凋亡外，还有内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的凋亡，内质网应激活化未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)来调控细胞凋亡，Chop、凋亡信号激酶ASK1/JNK、Bcl-2家族和caspase-12等分子参与其中，内质网应激诱导的凋亡与线粒体诱导的凋亡的作用相互交叉，Chop和活化的JNK可以激活Bax等促凋亡蛋白，使线粒体凋亡途径激活，导致细胞凋亡。

多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是一种恶性血液疾病，其特征是骨髓(bonemarrow,BM)中浆细胞异常克隆增殖，分泌大量的单克隆免疫球蛋白或其片段，导致肾脏、骨骼等组织或器官的损伤。MM发病率约占所有恶性血液病的10％，好发于老年人，随着我国人口老龄化的进展，MM发病人数有增加的趋势。常见临床表现为骨痛、贫血、肾功能不全或免疫力低下等。目前治疗MM的主要手段有激素、免疫调节剂、烷基类药物、蛋白酶抑制剂等。