[发明专利]一种外源GA3诱导山药试管薯形成的方法

说明书

本发明公开了一种外源GA₃诱导山药试管薯形成的方法，包括以下步骤：(1)取山药无菌苗，接种于添加GA₃的试管薯诱导培养基中，GA₃的浓度为0.2‑2.5mg/L；(2)在培养基中进行培养，培养条件为：温度20‑30℃、光强1500‑2000lux，光照周期为光照10‑14h·d^‑1，黑暗10‑14h·d^‑1，培养一段时间形成试管薯。本发明外源GA₃诱导山药试管薯形成的方法，山药试管薯诱导形成快，接种后10天就有小薯开始形成。试管薯的诱导率较高，为97‑100％。且试管的质量较好，在培养基上诱导培养60天后，单个试管薯平均重量在0.23‑0.42g之间。

技术领域

本发明涉及山药种植领域，特别涉及一种外源GA₃诱导山药试管薯形成的方法。

背景技术

山药又名薯蓣、山芋等，属薯蓣科(Dioscoreaceae)薯蓣属(Dioscorea L.)的单子叶植物，药食兼优，食用部位为块茎。我国薯蓣属植物有48种，其中许多种类具有重要的经济价值，如热带和亚热带地区广为栽培的参薯(D.alata)、温带地区普遍栽培的薯蓣(D.opposita)、褐苞薯蓣(D.persimilis)、山薯(D.fordii Prain et Burk.)等。山药具有很高的营养价值和保健作用，因此深受国内外广大消费者的喜爱，其在我国的种植面积也日益扩大。生产中，山药主要通过两种方式繁殖，一种是块茎繁殖，用种量大，生产成本较高，易受季节限制，并且长期利用块茎繁殖易造成种性退化，抗病性和抗逆性减退；另一种是组织培养快速繁殖，虽然具有繁殖系数高，繁殖速度快、不受季节限制等优点，但组培苗又存在驯化要求严格、运输困难、移栽成活率无法保证等问题。试管薯是山药在离体条件下腑芽形成的一种变态器官，因为它对光、温度、湿度等变化的耐性更强，易保存，运输方便，利于不同地域间的种质交换。可见，山药试管薯在种质离体保存、繁殖及遗传资源交换方面具有突出优势，是一种解决组培快繁中存在的一系列问题的好方法。

外源植物激素与试管薯的形成过程密切相关，不同激素种类及配比对组培苗试管薯的诱导差异很大。目前，在山药中较多研究集中在生长素、细胞分裂素等激素的浓度与配比对试管薯的诱导效果上，而对赤霉素类(GAs)对山药试管薯的诱导研究和应用较少。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一种外源GA₃诱导山药试管薯形成的方法，从而克服山药传统块茎繁殖用种量大、成本高及种质退化等问题以及组培快繁中存在的组织苗驯化要求严格、运输困难、移栽成活率偏低等技术问题的缺点。

为实现上述目的，本发明提供了一种外源GA₃诱导山药试管薯形成的方法，包括以下步骤：

(1)取山药无菌苗，接种于添加GA₃的试管薯诱导培养基中，GA₃的浓度为0.2-2.5mg/L；

(2)在培养基中进行培养，培养条件为：温度20-30℃、光强1500-2000lux，光照周期为光照10-14h·d^-1，黑暗10-14h·d^-1，培养一段时间形成试管薯。

优选地，上述技术方案中，步骤(1)中GA₃诱导效果较好的浓度为1.5-2.5mg/L。

优选地，上述技术方案中，步骤(1)中培养基主要由以下原料制成：MS培养基、GA₃、活性炭、蔗糖和琼脂。

优选地，上述技术方案中，活性炭的浓度为0.1-0.5g/L，蔗糖的浓度为40-50g/L，琼脂的浓度为8-9g/L。