[发明专利]牛传染性鼻气管炎病毒多表位重组嵌合蛋白及其应用

说明书

本发明提供牛传染性鼻气管炎病毒多表位重组嵌合蛋白及其应用。所述重组嵌合蛋白由破伤风毒素通用T细胞表位多肽P2，牛传染性鼻气管炎病毒gB上的抗原表位gB‑A、gB‑B，牛传染性鼻气管炎病毒gC上的抗原表位gC‑A、gC‑B，牛传染性鼻气管炎病毒gD上的抗原表位gD‑A、gD‑B、gD‑C以及牛IL‑6之间通过刚性Linker串联而成。本发明提供的牛传染性鼻气管炎病毒多表位重组嵌合蛋白诱导产生的抗牛传染性鼻气管炎病毒的抗体水平显著高于其他对照组，表明该重组嵌合蛋白具有良好的免疫原性。

技术领域

本发明属于分子生物学和基因工程领域，具体地说，涉及牛传染性鼻气管炎病毒多表位重组嵌合蛋白及其应用。

背景技术

牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)又称牛I型疱疹病毒(Bovine herpesvirus 1,BHV-1)，是危害养牛业发展的一种重要病原体，可导致严重的呼吸道疾病。在急性感染后，BHV-1可在三叉神经节或背部神经节建立终身潜伏感染，当受到应激因素刺激后，处于潜伏感染状态的BHV-1可被激活并重新排出体外，给控制和消灭BHV-1导致的相关疾病造成极大困难。

牛传染性鼻气管炎病毒是世界范围内引起牛传染病的一种重要病原体。它能使牛出现高热、呼吸困难、鼻炎、窦炎和上呼吸道炎症等症状，还可损害牛的生殖系统，使牛出现流产和死胎以及发生肠炎和小牛脑炎等症状，有时也发生眼结膜炎和角膜炎，但常呈亚临床经过。由病毒感染导致的细胞免疫功能降低和免疫抑制常引起继发性细菌感染，使该病的致死率升高。1955年在美国首次发现以牛传染性鼻气管炎为主要症状的疾病，并被命名为IBR。1956年Madin等人首次从患牛中分离出病毒，随后一些研究者相继从病牛的结膜、外阴、大脑和流产胎儿分离出该病毒，在1964年Hcuk鉴定其为疱疹病毒，并确定IBR在全球流行。目前，一些国家通过捕杀阳性牛和注射基因缺失疫苗根除了此病。但IBR在大多数国家阳性率仍很高。2018年Morris等人对特立尼达和多巴哥的92个牛场进行血清学调查，结果显示IBRV的阳性率为20.7％。2016年对肯尼亚西部地区的牛群进行IBR流行情况进行检测，阳性检出率为20.9％。2015年对澳大利亚维多利亚西南部地区128头公牛进行检测，阳性率为7.8％。

我国在1980年首次从新西兰进口牛群中分离到该病毒，此后，牛传染性鼻气管炎感染情况一直呈上升趋势。近年来，随着我国养牛业的发展以及养殖规模扩大，IBRV的感染情况越发严重，在全国各地以及各个品种的牛群中都有报道。2016年何小丽等人对宁夏地区部分奶牛场进行IBR流行病学调查，在135份耳组织和376份血清中，平均阳性率为85.1％。2016年谢春芳等人对上海市崇明岛地区两个规模化养殖场进行IBR流行病学检测，在共采集的385份血清样品中，阳性率分别为41.2％和74.3％。2016年刘洁琼等人对新疆地区部分养殖场进行IBR流行病学调查，在522份血清样本和208份组织样本中，阳性率达到80.7％。2016年对青藏高原横断面地区耗牛进行IBR流行病学检测，共收集西藏(988牦牛)，青海(475牦牛)和四川(377牦牛)三个省份的1840份血清样品，阳性样本中西藏样本381个(38.6％)，青海样本212个(44.6％)和四川样本105个(27.9％)。2015年蔺晓月等人对山东省部分地区IBR流行情况进行调查，对采集到的741份血清样本检测，阳性率为31.52％。通过对我国部分地区的流行病学调查分析，IBR在我国阳性率依然较高。同时，IBRV通常与多种病毒混合感染，如牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型等。

IBRV通过空气传播途径感染牛体后，可在上呼吸道和扁桃体的粘膜中大量复制。动物感染IBRV后2-4天，出现鼻腔出血，唾液分泌，发烧，厌食和明显抑郁等症状。在进行自然交配时，生殖器感染可导致感染性脓疱性外阴阴道炎(IPV)和传染性脓疱性阴茎头包皮炎(IPB)。由IBRV引起的呼吸系统或生殖系统疾病的普通病例通常持续约5-10天。但若继发感染细菌或其他病毒，会使病情加重导致死亡。