[发明专利]一种黄芩素活性探针及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种黄芩素活性探针的合成方法，其特征在于，所述活性探针是以黄芩素为反应基团，二吖丙啶为光交联基团，炔基为生物正交基团；所述黄芩素活性探针的结构式如下：

所述黄芩素活性探针的合成方法，合成步骤如下：

1）合成双吖丙啶-炔基“手臂”；

2）将2.7g，10mmol的黄芩素和1.25g，14.0mmol的NaOAc溶解在15mL乙酸酐中，并将溶液在75℃下搅拌直至起始物质消失；

3）将步骤2）得到的反应混合物倒入150mL冰水中，过滤收集沉淀物并用乙醇EtOH洗涤，得到3.56g，90％的化合物乙酰黄芩素，为浅白色粉末；

4）取1当量双吖丙啶-炔基“手臂”，1当量乙酰黄芩素，2当量碳酸钾，在无水丙酮中回流24小时；

5）将步骤4）得到的回流产物，干燥加载硅胶柱后得到产物黄芩素探针，其反应式如下：

。

2.根据权利要求1所述的一种黄芩素活性探针的合成方法合成的黄芩素活性探针在制备用于鉴定癌细胞中与黄芩素直接作用的蛋白质靶标药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述鉴定采用氨基酸稳定同位素标记联合蛋白质谱分析SILAC-ABPP的方法。

4.根据权利要求1所述的一种黄芩素活性探针的合成方法合成的黄芩素活性探针在制备用于检测100µM黄芩素对癌细胞氧化磷酸化通路的影响药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述细胞氧化磷酸化通路中的关键蛋白为ATP4A（P20648），ATP5A1（P25705），ATP5F1（P24539），ATP5L（O75964），ATP6V1A（P38606），ATP6V1H（Q9UI12），ATP12A（P54707）以及NDUFA13（Q9P0J0）。