[发明专利]一种促间充质干细胞生长的培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种促间充质干细胞生长的培养基，其特征在于，包括无血清的基础培养基及在其基础上增添的添加剂，所述添加剂的成分以终浓度计，木芙蓉提取物80-120 ng/mL、海藻多糖30-50 ng/mL、黄芪甲苷25-40 ng/mL、人血白蛋白30-50 μg/mL、转铁蛋白10-20 μg/mL、谷氨酰胺3-5 nM/mL、血小板衍生因子10-20 ng/mL、表皮生长因子10-20 ng/mL、成纤维生长因子10-18 ng/mL、人胰岛素生长因子10-20 ng/mL、维生素A 3-5ng/mL。

2.根据权利要求1所述一种促间充质干细胞生长的培养基，其特征在于，包括无血清的基础培养基及在其基础上增添的添加剂，所述添加剂的成分以终浓度计，木芙蓉提取物80ng/mL、海藻多糖30 ng/mL、黄芪甲苷25 ng/mL、人血白蛋白30μg/mL、转铁蛋白10μg/mL、谷氨酰胺3 nM/mL、血小板衍生因子10 ng/mL、表皮生长因子10 ng/mL、成纤维生长因子10ng/mL、人胰岛素生长因子10 ng/mL、维生素A 3 ng/mL。

3.如权利要求1所述一种促间充质干细胞生长的培养基，其特征在于，所述添加剂的成分以终浓度计，木芙蓉提取物120ng/mL、海藻多糖50 ng/mL、黄芪甲苷40 ng/mL、人血白蛋白50μg/mL、转铁蛋白20μg/mL、谷氨酰胺5 nM/mL、血小板衍生因子20 ng/mL、表皮生长因子20 ng/mL、成纤维生长因子18 ng/mL、人胰岛素生长因子20 ng/mL、维生素A 5 ng/mL。

4.根据权利要求1所述一种促间充质干细胞生长的培养基，其特征在于，所述添加剂的成分以终浓度计，木芙蓉提取物110 ng/mL、海藻多糖40 ng/mL、黄芪甲苷30 ng/mL、人血白蛋白45 μg/mL、转铁蛋白15 μg/mL、谷氨酰胺4 nM/mL、血小板衍生因子15 ng/mL、表皮生长因子15 ng/mL、成纤维生长因子15 ng/mL、人胰岛素生长因子15 ng/mL、维生素A 4 ng/mL。

5.根据权利要求1-4任意一项所述一种促间充质干细胞生长的培养基，其特征在于，所述基础培养基为DMEM或F12培养基。

6.如权利要求1-4任意一项所述一种促间充质干细胞生长的培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）准确称取相应量的木芙蓉提取物、海藻多糖、黄芪甲苷、人血白蛋白、转铁蛋白、谷氨酰胺、血小板衍生因子、表皮生长因子、成纤维生长因子、人胰岛素生长因子、维生素A，先将木芙蓉提取物、海藻多糖、黄芪甲苷加入到无血清基础培养基中，搅拌混匀20-30min；再将人血白蛋白、转铁蛋白、谷氨酰胺、血小板衍生因子、表皮生长因子、成纤维生长因子、人胰岛素生长因子加入上述混匀溶液中，继续搅拌10-15min；最后，加入维生素A，并加以搅拌均匀；

（2）利用质量分数为6%-8%的碳酸钠溶液对步骤（1）所得混合培养基进行PH调节，将混合培养基的PH调至7.05-7.35；

（3）将步骤（2）所得混合培养基进行0.22μm滤膜过滤除菌，即可得培养基。

7.如权利要求6所述的一种促间充质干细胞生长的培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）搅拌时间为30分钟。

8.如权利要求6所述的一种促间充质干细胞生长的培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）继续搅拌10分钟。

9.如权利要求6所述的一种促间充质干细胞生长的培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）向步骤（1）所得混合培养基中加入质量分数为7%的碳酸钠溶液。

10.如权利要求6所述的一种促间充质干细胞生长的培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）调节培养基的pH至7.2。