[发明专利]含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物及提取物的制备方法及组合物的应用

权利要求书

1.含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述组合物包括脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物，水飞蓟提取物，茶多酚，L-肌肽，月见草提取物；其中，所述组分按照重量份数计，包括脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物0.15-6份、水飞蓟提取物0.02-2份、茶多酚0.01-1份、L-肌肽0.01-1.8份、月见草提取物0.05-4.5份。

2.根据权利要求1所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述组分按照重量份数计搅拌混匀，脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物1.5份、水飞蓟提取物0.8份、茶多酚0.5份、L-肌肽0.45份、月见草提取物3.5份。

3.根据权利要求1所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述组分按照重量份数计搅拌混匀，脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物4.5份、水飞蓟提取物1.7份、茶多酚0.8份、L-肌肽1.5份、月见草提取物1.5份。

4.根据权利要求1所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述组分按照重量份数计搅拌混匀，脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物6份、水飞蓟提取物0.5份、茶多酚0.25份、L-肌肽1.25份、月见草提取物0.5份。

5.根据权利要求1-4任意一项所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，组合物中的脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将脂肪间充质干细胞以密度为1x10⁵-1x10⁶接种于T75培养瓶中，放置二氧化碳培养箱中培养至细胞密度达90％-100％时，弃去上清培养基，将脂肪间充质干细胞进行低氧饥饿诱导培养24h-36h，然后收集诱导培养的上清液。

(2)培养上清液先高速2000rpm-4000rpm低温离心弃去细胞碎片，收集上清液；上清液再进行超高速10000rpm-12000rpm低温离心，弃去上清液，收集脂肪间充质干细胞外泌蛋白；得到的外泌蛋白再利用BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白含量。

6.根据权利要求5所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞来源于人体。

7.根据权利要求5所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述步骤(1)脂肪间充质干细胞为培养至第三代、第四代、第五代中的一种；所述步骤(1)低氧饥饿诱导条件为将生理盐水替换培养基，在37℃，1.0％O2三气培养箱内培养细胞。

8.根据权利要求5所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，所述步骤(2)高速低温离心条件为3000rpm，4℃，离心10min；所述步骤(2)超高速低温离心条件为10000rpm，4℃，离心20min。

9.根据权利要求5所述含有脂肪间充质干细胞外泌蛋白提取物的干细胞组合物，其特征在于，该组合物应用在皮肤抗糖化和抗衰老化妆品中制成如下产品；

一种含有干细胞组合物的抗糖化化妆水，由功效组分和载体混合组成，按照重量百分数计，其配方如下：

制作工艺：

(1)先将B相溶解好，备用；

(2)再将A相加热至50℃，搅拌溶解直至均匀一致；

(3)待A相冷却至40℃时，加入B相预混液，搅拌均匀后出料；

一种含有干细胞组合物的抗糖化精华液，由功效组分和载体混合组成，按照重量百分数计，其配方如下：

制作工艺：

(1)先将B相溶解好，备用；

(2)再将A相加热至50℃，搅拌溶解直至均匀一致；

(3)待A相冷却到40℃时，加入B相预混液，搅拌均匀后出料；

一种含有干细胞组合物的抗糖化面霜，由功效组分和载体混合组成，按照重量百分数计，其配方如下：

制作工艺：

(1)先将A相与B相分别搅拌溶解均匀，备用；

(2)再将C相组分加热至50℃，搅拌溶解直至均匀一致；

(3)将A相与B相混匀搅拌溶解，均质5min；

(4)待C相温度降至40℃时，加入A/B混匀相，搅拌均匀后出料；

一种含有干细胞组合物的抗糖化凝胶，由功效组分和载体混合组成，按照重量百分数计，其配方如下：

制作工艺：

(1)将A相混合溶解好，备用；

(2)再将B相加热至50℃，搅拌溶解至均匀一致，保温10min后开始降温；

(3)当温度降至40℃时加入A相预混液，搅拌均匀后出料。