[发明专利]一种发酵饲料含菌量的检测方法

说明书

本发明公开了一种发酵饲料含菌量的检测方法，包括以下步骤：饲料取样：将发酵良好的饲料正常发酵3‑4d后，开袋将袋内饲料混合均匀，从中称取一定量的饲料；研磨粉碎：将称取的饲料用粉碎装置研磨粉碎，用筛子筛选出大颗粒后重复研磨两次；溶解稀释：将研磨后的饲料稀释，置于摇床震荡，再进行梯度稀释；取液：使用移液枪抽取稀释后的饲料溶液，使用移液枪进行反复抽吸后，置于培养皿中；培养统计：使用涂布器将饲料溶液涂布均匀，放入恒温培养箱培养，根据菌种不同设置对应菌种所需的温度和培养时间，培养结束后统计菌落数量并记录。本发明提供了一种能够充分分散饲料中的微生物保证检测数据精确度的饲料中微生物检测方法。

技术领域

本发明涉及微生物检测技术领域，特别涉及一种发酵饲料含菌量的检测方法。

背景技术

微生物制剂在农业中的应用主要为种植和养殖过程中，在种植上的主要作用表现为促进植物生长、提高植物防病抗病能力、提高肥料利用率、提高植物抗旱、修复土壤、降解农药等；在养殖上的主要作用表现为补充、调整或维持动物肠道内微生态平衡，促进机体肠道吸收和提高宿主免疫水平；它还可以对由于集约化养殖造成的水体环境污染进行调整和修护，保持养殖环境的生态平衡。

由于制备方法的限制，传统的发酵饲料含菌量的浓度通常较低，如生物有机肥微生物制剂的产品的浓度标准一般在0.2亿/g或0.2亿/mL左右。随着发酵饲料的制备工艺的不断完善，产品中的微生物浓度也不断攀升，饲料中微生物密度极大，且饲料不溶于水，当饲料分散在水中的时候微生物溶解在水中，饲料中含有秸秆等植物纤维成分难溶于水，容易悬浮在水中，从而使得饲料中的微生物不能完全分散，如果用现有检测方法进行含菌量检测，培养基上的多个微生物可能会生长成为一个菌落，由此导致菌落数的统计结果大大低于实际值，从而使微生物含量的检测结果低于实际水平。

因此，我们需寻找一种能够将发酵饲料充分分散开保证检测精度的含菌量检测方法。

发明内容

本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供了一种能够充分分散饲料中的微生物保证检测数据精确度的饲料中微生物检测方法。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种发酵饲料含菌量的检测方法，包括以下步骤：

(1)饲料取样：将发酵良好的饲料正常发酵3-4d后，开袋将袋内饲料混合均匀，从中称取一定量的饲料；

(2)研磨粉碎：将步骤(1)中称取的饲料用粉碎装置研磨粉碎，用筛子筛选出大颗粒后重复研磨两次；

(3)溶解稀释：将步骤(2)中研磨后的饲料在一定时间内置于无菌三角瓶并加无菌水稀释至刻度线，加入玻璃珠并置于摇床震荡，再进行梯度稀释；(4)取液：使用移液枪抽取步骤(3)中稀释后的饲料溶液，使用移液枪进行反复抽吸后，观察吸入的最高位点，抽吸多次后取吸入最高位点的溶液量置于培养皿中；

(5)培养统计：使用涂布器将饲料溶液涂布均匀，放入恒温培养箱培养，根据菌种不同设置对应菌种所需的温度和培养时间，培养结束后统计菌落数量并记录。

进一步地，在步骤(2)中，所述粉碎装置包括研磨钵和研磨球，通过研磨球将饲料在研磨钵内粉碎，所述筛子为50目。

进一步地，所述研磨钵和研磨球均为不锈钢材质，该研磨球的研磨部位还设有刀片，该刀片的刀口竖直向下设置。

进一步地，在步骤(3)中，所述摇床为翻转摇床，该摇床可进行水浴加热，摇床的深度大于无菌三角瓶的高度，摇床内设有固定无菌三角瓶的机械爪。

进一步地，所述梯度稀释为使用100ml的锥形瓶，取出10ml后置于干净的锥形瓶中，加入无菌水至刻度线，再从中取10ml置于干净锥形瓶中，加水至刻度线后得到稀释液。