[发明专利]一种从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法有效
申请号: | 201910149167.7 | 申请日: | 2015-10-30 |
公开(公告)号: | CN109750073B | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 梁国斌;汪斌 | 申请(专利权)人: | 江苏理工学院 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C07K5/037;C12R1/72 |
代理公司: | 常州市江海阳光知识产权代理有限公司 32214 | 代理人: | 孙培英 |
地址: | 213001 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 产朊假丝 酵母 发酵 提取 谷胱甘肽 方法 | ||
1.一种从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法,其特征在于包括以下步骤:
①产朊假丝酵母种子培养和发酵;将产朊假丝酵母菌株接种于种子培养基中,28℃~32℃下培养18~28小时,摇床转速200~250rpm,培养至对数期时停止培养,得到的种子液待发酵培养;
②收集步骤①发酵培养完毕的产朊假丝酵母发酵液,离心后去除上清液,收集的细胞在-15℃~-25℃下冷冻20~30分钟;
③将步骤②冷冻后的产朊假丝酵母细胞加入硫酸溶液中,硫酸溶液中产朊假丝酵母细胞的浓度为0.08g/mL~0.12g/mL,硫酸溶液的pH值为1~2, 20℃~35℃下放置15~30分钟后, 产朊假丝酵母细胞内的还原型谷胱甘肽从胞内释放出来溶解在硫酸溶液中,完成从产朊假丝酵母发酵液中对谷胱甘肽的提取,离心分离,收集上清液。
2.根据权利要求1所述的从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法,其特征在于:步骤①产朊假丝酵母发酵时,先将种子液按8%~10%的接种量接种在发酵基本培养基中分批培养8~10h,再按照细胞比生长速率0.15h-1~0.25h-1指数流加培养11~13h,接着以5.0~6.0g(h﹒L)-1恒数流加培养23~25h后;向罐内加入三种氨基酸,加入后罐内谷氨酸 5.5~6.5 mmol/L、甘氨酸 5.0~6.0mmol/L、半胱氨酸6.0~7.0 mmol/L,继续培养25~35h完成产朊假丝酵母的发酵培养。
3.根据权利要求2所述的从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法,其特征在于:分批培养时所述发酵基本培养基组成为:葡萄糖15 g/L,硫酸铵5 g/L,酵母膏2 g/L,磷酸二氢钾1.5 g/L,硫酸镁0.25 g/L,发酵基本培养基的pH 值为5.5;
指数流加培养和恒数流加培养所用的均为流加培养基,流加培养基组成如下:葡萄糖500 g/L,硫酸铵36 g/L,磷酸二氢钾5 g/L,硫酸镁0.5 g/L,其中葡萄糖单独灭菌后与其它成分混合。
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