[发明专利]水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品及制备方法

权利要求书

1.水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品，其特征是：包括目标菌群与背景菌群，所述目标菌群由酿酒酵母、黑曲霉组成，所述背景菌群由蜡样芽胞杆菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌组成。

2.根据权利要求1所述的水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品，其特征是：所述样品基体为化妆水，化妆水体积分数为0.5%；保护剂以海藻糖和无菌水组成，其中海藻糖体积分数为10％。

3.根据权利要求1或2所述的水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品，其特征是：所述样品中目标菌群的目标浓度为10²～10³ CFU/mL，背景菌群的目标浓度为10³ CFU/mL。

4.根据权利要求1所述的水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品的制备方法，其特征是：包括冻干保护剂的配制、样品冻干、样品的均匀性和稳定性试验、样品定值四个步骤，其中样品冻干过程为：菌株复苏传代—增菌—菌悬液配制—冻干—包装—储存，具体过程为：

（1）菌株复苏传代

将标准菌株接种到营养琼脂斜面培养基中，在36±1℃下使其复苏和生长，并对复苏的菌株进行鉴定；

（2）增菌

目标菌培养至对数生长期末，背景菌群培养至稳定期，从斜面刮取菌落，加到10mL的冻干保护剂中制成相应单一菌种的菌液；

（3）菌悬液配制

将上一过程得到的菌液与冻干保护剂混合，按目标菌群的目标浓度10²～10³ CFU/mL和背景菌群的目标浓度10³ CFU/mL配制菌悬液，分别配制2个目标菌的菌悬液和3个背景菌的菌悬液，分别按1:1体积比混合形成目标菌群悬液和背景菌群悬液，再将目标菌群悬液与背景菌群悬液按1:1体积比混合，得到混合菌悬液，置于磁力搅拌器上不断搅拌，1：100比例添加化妆水，充分搅拌混匀后分装到样品瓶中，加上瓶塞，但要留有空隙，不要盖实；

（4）冻干和包装

将装有混合菌悬液的样品瓶开盖放入冻干机中，冷冻干燥50~55h，当样品冷冻干燥结束后，直接进行箱内加塞，关闭机器，样品瓶中样品为真空状态；

（5）储存

将样品放置在-15~-20℃条件下避光保存，从全部样品中随机挑选样品发放给实验室或进行均匀性和稳定性试验。

5.根据权利要求4所述的水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品的制备方法，其特征是：所述样品基体为化妆水，化妆水体积分数为0.5%；保护剂以海藻糖和无菌水组成，其中海藻糖体积分数为10％。

6.根据权利要求4所述的水溶性化妆品中霉菌和酵母菌计数标准样品的制备方法，其特征是：所述样品的均匀性和稳定性试验按照GB/T 15000.3-2008《标准样品工作导则（3）标准样品定值的一般原则和统计方法》进行。