[发明专利]一种龙血竭总黄酮的制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种龙血竭总黄酮的制备方法，将龙血竭药材粉碎成粗粉，加入乙醇和乙酸乙酯混合溶剂，在50～69℃条件下回流提取2次，每次15～29分钟即可。另外，本发明还提供了龙血竭总黄酮在制备防治自身免疫性疾病药物、减肥药物、肿瘤疾病药物、急慢性呼吸道疾病药物、心血管疾病药物中的应用。该发明提取的龙血竭总黄酮对动物的毒性要小于龙血竭，且龙血竭总黄酮阻断Kv1.3钾通道的活性要强于龙血竭，表明龙血竭总黄酮实现了活性组分的富集，剔除了可能产生毒副作用的杂质，提高了安全性的同时增强了对Kv1.3钾通道的阻断效应；另外，龙血竭总黄酮对Kv1.3钾通道的亲和力要高于龙血素B，实现了龙血竭总黄酮中多种阻断Kv1.3钾通道活性成分的协同作用。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种龙血竭总黄酮的制备方法及应用。

背景技术

机体正常的免疫反应能够有效抵御外界病原微生物的侵扰，而当机体免疫功能紊乱出现自身免疫抗原时，机体免疫系统会产生自身抗体，通过破坏自身脏器组织引发多种自身免疫性疾病。由于自身免疫性疾病的确切发病机制尚未明确，目前临床尚无彻底根治的办法。多采用激素类传统免疫抑制剂，如环磷酰胺、地塞米松等，这些激素类药物抗炎作用显著，能够快速改善自身免疫性疾病患者的临床症状，但这些药物不能消除病因，而且停药后会有反跳现象，若长期应用同时削弱了病人正常的免疫防御反应，会造成停药困难。目前国际上开发的用于治疗自身免疫性疾病的生物制剂，如白介素-6受体阻断药—Tocilizumab、单抗药物阿达木单抗等，治疗效果明显，但同样不能根治自身免疫性疾病，而这些生物制剂造价成本高，价格昂贵，治疗费用超出国内绝大多数自身免疫疾病患者的实际经济承受能力，不宜在我国广泛使用。

新近的研究表明自身免疫性疾病的发病机制主要涉及效应记忆T淋巴细胞(Effector Memory T细胞，T_EM细胞)的异常激活和增殖，该过程与T_EM细胞膜上电压门控性钾通道Kv1.3过高表达密切相关，药物阻断或基因敲除Kv1.3后，对多种类型的自身免疫性模型动物表现出较强的治疗作用，表明Kv1.3通道是筛选特异性自身免疫性疾病治疗药物的新靶点，Kv1.3通道阻断剂治疗自身免疫疾病应用前景广阔。来源于植物的天然化合物作为传统药物在疾病的治疗过程中发挥了关键作用，被认为是开发新药的重要资源库。以广泛使用的传统中草药为对象，检测其是否可以调节哺乳动物Kv1.3通道功能，并进行相应的生物活性单体筛选和结构优化，将极大加速我国研发Kv1.3通道阻断剂的进程。

傣药龙血竭已被证实能够阻断Kv1.3通道而对自身免疫性脑炎和类风湿性关节炎大鼠产生有效的防治作用，疗效持久，但龙血竭是来自剑叶龙血树浆液的粗制品，含有黄酮类、萜类、酚类、甾体类等多种组分，组成成分复杂，易引发难以预料的毒副作用。另外，龙血竭黄酮类单体龙血素B也被证实能够阻断Kv1.3通道而对自身免疫性脑炎和类风湿性关节炎大鼠产生有效的防治作用，龙血素B的阻断效应容易被洗脱，药效不能持久。

发明内容

本发明提供了一种龙血竭总黄酮的制备方法，制得的龙血竭总黄酮能够阻断Kv1.3钾通道，阻断效率和安全性均要高于龙血竭，且不易洗脱。

本发明的技术方案是提供了一种龙血竭总黄酮的制备方法，将龙血竭药材粉碎成粗粉，加入11倍量的乙醇和乙酸乙酯混合溶剂，在50～69℃条件下回流提取2次，每次15～29分钟即可。

进一步的，所述混合溶剂中乙醇和乙酸乙酯的体积比为5:5～1:10。

另外，本发明还提供了龙血竭总黄酮在制备Kv1.3通道阻断剂中的应用。

进一步的，所述龙血竭总黄酮包括龙血素B，以及至少一种查尔酮类化合物。

进一步的，所述查尔酮类化合物为剑叶龙血素A或剑叶龙血素B。

进一步的，所述Kv1.3通道阻断剂用于制备防治自身免疫性疾病的药物，所述自身免疫性疾病为多发性硬化症、类风湿性关节炎、银屑病、系统性红斑狼疮、溃疡性结肠炎、I型糖尿病。