[发明专利]玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3pro217

说明书

玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3_pro217及其应用，涉及基因工程领域。该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，一种含有该启动子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌株，且该启动子能应用在转基因植株中。本发明通过试验研究表明ZmCOL3_pro217具有启动子活性，且表达存在组织特异性，主要在根、叶子中表达量较高。热带血缘玉米材料中获得一个有活性的新ZmCOL3启动子，预示着热带血缘玉米材料中ZmCOL3基因受调控的机制可能与温带血缘材料不同，启动子序列上的差异可能是ZmCOL3基因在玉米从热带地区到温带地区人工选择进化的结果。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3_pro217及其应用。

背景技术

启动子是一段能够起始基因转录的DNA序列，也是基因表达调控的重要顺式作用元件。目前已经报道的启动子主要包括：组成型启动子、组织或器官特异型启动子、诱导型启动子等。启动子活性是决定功能基因表达的关键。解析启动子的功能对于明确基因调控详细作用机理具有重要意义。

ZmCOL3基因是玉米开花期光周期调控网络中一个重要的功能基因，该基因表达水平的变化可显著调节玉米花期3-5天。因此，了解ZmCOL3启动子活性对于揭示ZmCOL3基因详细的调控机制具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物来源的新启动子，为研究转基因植物表达、调控以及利用基因工程技术改良作物提供重要的核心元件，为此，本发明提供一种玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3_pro217及其应用。

本发明为解决技术问题所采用的技术方案如下：

本发明的玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3_pro217，该启动子 ZmCOL3_pro217的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

作为优选的实施方式，该启动子ZmCOL3_pro217区域含有的顺势作用元件信息如下表所示：

本发明的一种含有上述玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3_pro217的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌株。

作为优选的实施方式，上述的重组载体为植物表达载体 pCAMBIA3300::P217::gus。

本发明的玉米开花基因ZmCol3启动子ZmCOL3_pro217能够应用在转基因植株中。

作为优选的实施方式，所述转基因植株为转基因玉米植株。

本发明的有益效果是：本发明以热带血缘玉米材料CIMBL119为供试材料，成功克隆了ZmCOL3启动子，生物信息学研究表明：该启动子与温带血缘B73 测序种存在大片段置换的序列差异，是一个新的启动子，将其命名为：ZmCOL3_pro217。

本发明通过构建ZmCOL3_pro217驱动gus基因表达的植物表达载体 pCAMBIA3300::P217::gus，农杆菌介导法转化玉米获得转基因玉米植株。通过实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附实验(ELISA)、β-葡萄糖苷酸酶(GUS)的组织化学染色等试验对其进行研究，结果表明：ZmCOL3_pro217具有启动子活性，且表达存在组织特异性，主要在根、叶子中表达量较高。热带血缘玉米材料中获得一个有活性的新ZmCOL3启动子，预示着热带血缘玉米材料中ZmCOL3基因受调控的机制可能与温带血缘材料不同，启动子序列上的差异可能是 ZmCOL3基因在玉米从热带地区到温带地区人工选择进化的结果。

附图说明