[发明专利]痛风诊断生物标志物及其应用

说明书

本发明涉及痛风诊断生物标志物及其应用。本发明的痛风诊断生物标志物包括苯丙酮酸、异烟肼α‑酮戊二酸、16‑表啡肽和4‑羟基肉桂醛。可采用质谱方法检测得到本发明的痛风诊断标志物，并由这些标志物确定对象是否患有痛风，或患痛风的风险。本发明还包括相应的诊断试剂盒。

技术领域

本发明涉及痛风诊断生物标志物及其应用。

背景技术

痛风患者经常会在夜晚出现突然性的关节疼，发病急，关节部位出现严重的疼痛、水肿、红肿和炎症。最常发病的关节是第一跖骨，但发病的关节不限于此，还常见于手部的关节、膝盖、肘部等。发病的关节最终会红肿、发炎，水肿后组织变软，活动受限。

目前，痛风的检查项目包括：血尿常规和血沉，血尿酸测定，尿检和关节腔穿刺检查。急性发作期绝大多数病人血清尿酸含量升高。一般认为采用尿酸酶法测定，男性420umol/L(7mg/DL)，女性360umol/L(6mg/DL)，具有诊断价值。急性痛风性关节炎发作时，肿胀关节腔内可有积液，以注射针抽取滑液检查，具有极其重要诊断意义。即使在无症状期，亦可在许多关节找到尿酸钠结晶。约95％以上急性痛风性关节炎滑液中可发现尿酸盐结晶。关节腔穿刺检查可采用偏振光显微镜检查、普通显微镜检查、紫外分光光度计测定、紫尿酸胺试验和尿酸盐溶解试验等进行检查。

发明内容

本发明提供新的痛风诊断生物标志物。本发明的痛风诊断生物标志物包括苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽(16-Epivellosimine)和4-羟基肉桂醛。

具体而言，本发明提供一种痛风诊断方法，所述方法包括检测对象血清中苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽和4-羟基肉桂醛的步骤。

在一个或多个实施方案中，采用质谱检测对象血清中苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽和4-羟基肉桂醛的浓度。

在一个或多个实施方案中，血清体积为50微升。

在一个或多个实施方案中，检测得到苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽和4-羟基肉桂醛的血清浓度后，将所述浓度代入下式：

判定阈值＝-1.488+0.0011828×M₁+0.0012194×M₂-0.0009549×M₃-0.0015879×M₄

其中，M₁表示苯丙酮酸的离子响应丰度；M₂表示异烟肼α-酮戊二酸的离子响应丰度；M₃表示16-表啡肽的离子响应丰度；M₄表示4-羟基肉桂醛的离子响应丰度；

其中，若判定阈值小于等于0.68，则诊断患有痛风或患上痛风的风险相对较高；若判定阈值大于0.68，则诊断不患有痛风或换上痛风的风险相对较低。

本发明还提供苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽和4-羟基肉桂醛作为生物标志物在痛风诊断中的应用。

本发明还提供用于苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽和4-羟基肉桂醛的检测的试剂在制备痛风诊断试剂盒中的应用。

在一个或多个实施方案中，所述试剂是采用质谱检测所述苯丙酮酸、异烟肼α-酮戊二酸、16-表啡肽和4-羟基肉桂醛所需的试剂。

在一个或多个实施方案中，所述试剂包括NH₄OH、NH₄OAc和乙腈(ACN)。

在一个或多个实施方案中，所述试剂还包括从血清中分离出血清所含蛋白质的试剂。

在一个或多个实施方案中，所述从血清中分离出血清所含蛋白质的试剂为甲醇。