[发明专利]一种将被多糖物质吸附的蛋白质释放到溶液中的方法

权利要求书

1.一种将被多糖物质吸附的蛋白质释放到溶液中的方法，其特征在于：

在含有多糖物质及蛋白质的混合物中，添加单糖、低聚糖、糖醇溶液或其组合，充分混匀孵育；

所述混合物为含有多糖物质及蛋白质的水性体系，或所述水性体系经固液分离得到的沉淀物；

所述水性体系中，多糖物质有部分未溶解，且所述蛋白质的至少一部分吸附于未溶解的多糖物质，

其中，所述单糖为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、核糖、木糖、来苏糖、赤藓糖、苏力糖之一或其组合；所述低聚糖包括蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、低聚果糖、大豆低聚糖之一或其组合；所述糖醇包括山梨醇、甘露醇、木糖醇和麦芽糖醇之一或其组合，

所述水性体系为包含乳酸克鲁维酵母细胞提取物的体外无细胞蛋白合成反应后体系。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括：在充分混匀孵育后分离或检测所述蛋白质。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述混匀孵育的温度与所述含有多糖物质及蛋白质的混合物放置的温度相同。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，在所述混匀孵育的温度下，所述单糖、低聚糖、糖醇溶液的浓度达到或接近该温度下的饱和浓度。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单糖、低聚糖、糖醇溶液用PBS缓冲液进行配置。

6.如权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于：所述多糖物质选自含有一个或多个葡萄糖结构单元的多糖之一或其组合。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述多糖物质选自淀粉、糊精、糖原、纤维素之一或其组合。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述糊精是麦芽糊精。

9.一种在体外无细胞蛋白合成体系中将被多糖物质吸附的外源蛋白解吸到溶液中的方法，其特征在于，包括：

(i)提供体外无细胞蛋白合成体系，添加编码外源蛋白的DNA分子模板，孵育反应体系，从而合成所述外源蛋白；

(ii) 蛋白合成反应结束后，向反应后混合液中添加单糖、低聚糖、糖醇之一或其组合，充分混匀孵育，

其中，所述单糖为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、核糖、木糖、来苏糖、赤藓糖、苏力糖之一或其组合；所述低聚糖包括蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、低聚果糖、大豆低聚糖之一或其组合；所述糖醇包括山梨醇、甘露醇、木糖醇和麦芽糖醇之一或其组合，

所述体外无细胞蛋白合成反应体系包含乳酸克鲁维酵母细胞提取物。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括：(iii)分离或检测所述外源蛋白。

11.一种在体外无细胞蛋白合成体系中将被多糖物质吸附的外源蛋白解吸到溶液中的方法，其特征在于，包括：

(i)提供体外无细胞蛋白合成体系，添加编码外源蛋白的DNA分子模板，孵育反应体系，从而合成所述外源蛋白；

(ii) 蛋白合成反应结束后，从反应后混合液分离出上清液，残余沉淀物质中添加单糖、低聚糖、糖醇之一或其组合，充分混匀孵育，

其中，所述单糖为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、核糖、木糖、来苏糖、赤藓糖、苏力糖之一或其组合；所述低聚糖包括蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、低聚果糖、大豆低聚糖之一或其组合；所述糖醇包括山梨醇、甘露醇、木糖醇和麦芽糖醇之一或其组合，

所述体外无细胞蛋白合成体系包括细胞提取物，所述细胞提取物的细胞来源选自乳酸克鲁维酵母细胞。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括：(iii)分离或检测所述外源蛋白。