[发明专利]一种叶绿体蛋白和ATPase酶活性突变体在提高植物抗逆性中的应用有效
申请号: | 201910151790.6 | 申请日: | 2019-02-28 |
公开(公告)号: | CN109867715B | 公开(公告)日: | 2022-06-17 |
发明(设计)人: | 刘莉;杨红;李萍;袁文雅 | 申请(专利权)人: | 中国科学院昆明植物研究所 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N9/14;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46;A01H11/00 |
代理公司: | 深圳泛航知识产权代理事务所(普通合伙) 44867 | 代理人: | 邓爱军 |
地址: | 650201 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 叶绿体 蛋白 atpase 活性 突变体 提高 植物 抗逆性 中的 应用 | ||
1.PpHsp70基因的ATPase酶活性突变体在提高植物抗逆性中的应用,其特征在于,所述植物抗逆性中的应用是指耐高温、耐旱、耐盐胁迫中的应用;
其特征在于,所述PpHsp70基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;
所述PpHsp70基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;
所述PpHsp70基因的ATPase酶活性突变体的序列为在PpHsp70基因编码的蛋白质的氨基酸序列的第271个氨基酸位点发生了苏氨酸到丙氨酸T271A突变;
所述植物为小立碗藓和水稻。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述提高植物耐高温、耐旱、耐盐胁迫性是通过下述方法步骤得以实现的:
(1)将权利要求1所述编码序列连接于植物表达调控序列,形成植物表达载体;
(2)将所述植物表达载体通过PEG介导的原生质体法导入小立碗藓,通过农杆菌侵染的方法转入水稻植物细胞,筛选得到转化细胞;
(3)将所述转化细胞进行植株再生,鉴定后得到转基因阳性植株;
(4)将所述转基因阳性植株进行抗逆性筛选和评价。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述抗逆性为抗高温、抗干旱和抗高盐。
4.一种提高植物抗逆性的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:
(1)将权利要求1中所述的PpHsp70基因编码的蛋白质的氨基酸序列的第271个氨基酸位点发生了苏氨酸到丙氨酸T271A突变获得PpHsp70m基因,测试ATPase酶活性;
(2)将PpHsp70m连接于植物表达调控序列,形成植物重组表达载体,分别为小立碗藓表达载体和水稻表达载体;
(3)将所述植物重组表达载体通过PEG介导的原生质体转化方法导入小立碗藓细胞,筛选得到转化植株;
(4)将所述植物重组表达载体通过农杆菌介导的方法转入水稻植物愈伤组织,筛选得到转化植株;
(5)将所述得到的PpHsp70m基因过表达的小立碗藓植株进行抗逆性筛选,获得抗性指标;
(6)将所述得到的PpHsp70m基因过表达的水稻植株T0代收获得到的种子发芽后苗期进行抗逆性筛选,获得抗性指标;
所述抗逆性指的是耐高温、耐旱、耐盐胁迫。
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