[发明专利]一种测定微囊藻毒素浓度的方法

说明书

本发明提供了一种测定微囊藻毒素浓度的方法，基于二硫化钼量子点可以与金纳米颗粒通过内滤效应发生作用，然而微囊藻毒素可以影响其适配体修饰的金纳米颗粒在高盐溶液中的聚散程度，实现了水环境中微囊藻毒素浓度的检测。本发明中使用的二硫化钼的上转换荧光能够有效地避免水环境中背景基质荧光的干扰，光学稳定性好，检测结果准确可靠，成本低廉，操作简单，绿色环保，检测专一性好，避免其它常见金属离子或阴离子对微囊藻毒素的测定的影响，抗干扰能力强，且结果灵敏可靠，检测限低，响应速度快，整个反应过程只需要20min，大大的提高了检测效率，稳定性好，能够实现实时在线的快速、专一性检测，可以用于实际水环境微囊藻毒素的简单快速检测。

技术领域

本发明属于环保技术领域，具体涉及一种基于上转换荧光的二硫化钼量子点测定微囊藻毒素浓度的方法。

背景技术

微囊藻毒素（MCs）是有害蓝藻水华释放的一类环状七肽类肝毒素，具有强烈的致癌作用，是诱发肝癌、肠胃炎等疾病的重要环境因素。鉴于MCs的毒性及其危害，世界卫生组织（WHO）已将MCs列为饮用水中需控制的有害污染物。MCs与肝炎病毒、黄曲毒素共同被列为诱发我国南方原发性肝癌高发的三大环境危险因素，对此我国在2006年新颁布的《生活饮用水卫生标准》（GB5749—2006）中对MCs含量进行了规定，其含量不得高于1 μg/L。蓝藻水华引发的MCs次生污染及其对人体健康的危害已引起了人们的关注，已成为全球共同面临的一个环境科学问题。

目前，国内外针对水体中MCs的分析检测技术主要在实验室展开，包括高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用、酶联免疫法、放射性免疫、盐水虾法和生物探针等方法，具有检测灵敏度高、选择性好、特异性强等优点，但操作繁琐、检测时间较长、或是检测成本太高，不易于现场监测和实现突发性污染事件的监控，严重制约了对水体中MCs污染的及时动态了解。由于荧光方法操作简单、成本低、检测灵敏并且具有实时监测等优点备受研究者青睐，近几年在生物和环境监测方面也得到了广泛的运用。但是由于MCs本身缺少直接影响荧光基团发光的结构，故涉及利用荧光方法检测环境中MCs的工作报道就很少。已有的几种测定MCs的荧光方法往往面临复杂的抗体抗原修饰、成本比较高和易失活的抗体或是所采用的荧光信号分子荧光染料和半导体量子点具有高毒性和易光漂白、易受到自然水体中腐殖酸的背景荧光干扰等问题。如发明专利201610980678.X公开了一种可循环使用的用于检测微囊藻毒素的荧光传感器及其应用方法，利用目标物微囊藻毒素影响DNA修饰的石墨烯量子点“Y字型”聚集体的形成，从而通过荧光光谱的变化来进行检测，但该方法易受环境水样中腐殖酸的背景荧光干扰，导致检测结果的准确度较低。因此，针对水体中MCs污染现状(低浓度、高毒性、多种有机和无机污染物共存)，发展快速、高灵敏、特异性强、避免机制干扰、环境友好型和现场适用的MCs传感检测技术，对于监控水体中MCs污染控制措施的实施情况和保障饮水安全具有重大意义。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的在于提供了一种测定微囊藻毒素浓度的方法，解决现有检测方法具有操作复杂、成本高和选择性低的问题。

为实现上述目的，本发明采用如下方案：一种测定微囊藻毒素浓度的方法，具体包括以下步骤：

1）二硫化钼量子点原液的制备：

取四水钼酸铵、N-乙酰基-L-半胱氨酸和硫脲加入水中并在冰浴下充分混合，得到混合溶液，再将所述混合溶液转移至水热反应釜中加热反应后，自然冷却，然后将其离心分离取上清液，即得到二硫化钼量子点原液；

所述四水钼酸铵、N-乙酰基-L-半胱氨酸和硫脲的质量比为3.16:1:0.39。

2）绘制标准曲线：