[发明专利]一种假单胞菌微生物的制备方法及抑藻应用

说明书

本发明公开了一种本发明提供的一种假单胞菌微生物的制备方法，通过人工配置假单胞菌培养基，加入一定体积比的EM原液，进行选择性培养，再取一定体积比的已培养的假单胞菌培养液加入至新的假单胞菌培养基，经复培后，获得假单胞菌的菌液。其应用于水体富营养化抑制藻类爆发，抑藻方式是直接攻击藻细胞和分泌抑藻物质；且假单胞菌的数量与抑藻效果有关。作为“抑藻剂”，采用天然生物材料，环境亲和性强，假单胞菌产生的物质能够被环境所自然降解，使用中无二次污染，操作简便，可实施性强，安全性能高，抑制效果良好；使用时不受地域、节气的影响，有利于实际应用，为利用生物方法处理水体藻华问题提供新的方法和方向。

技术领域

本发明涉及一种假单胞菌微生物，具体涉及一种假单胞菌微生物的制备方法及抑藻应用，属于水体富营养化抑制藻类爆发技术领域。

背景技术

目前研究表明，菌类溶藻的作用方式，主要分为两大类:直接溶藻和间接溶藻。具体可以分为：

直接接触溶藻。某些细菌可以直接与藻细胞接触，通过释放可溶解纤维素的酶等物质消化藻细胞的细胞壁，然后逐步溶解整个藻细胞。

与藻营养竞争。某些细菌通过与藻类竞争C、N、P、K等营养物质，夺取藻类的营养，抑制藻类的生长。

形成菌胶膜。一些腐败菌、亚硝酸菌、大肠杆菌和枯草杆菌等会使藻类培养物颜色变暗黄并产生沉淀，同时发生腐败在作用生成异味。这些菌类还能在静态水面上集结形成菌胶膜，阻碍水体与环境之间的气体交换和光线投射，使水环境发生变化，不利于藻类的生长。

直接进入宿主藻细胞内杀死藻细胞。细菌可内生于不同种类的藻中，既可存在于细胞核，也可以在细胞质甚至细胞器中；但是，这种寄生一般对宿主细胞的影响不大。因此，能够入侵宿主细胞并使其溶解的细菌就有特殊意义。

释放抑藻物质。这是溶藻菌类最常见的抑藻方式。细菌可以通过释放特异性或非特异性地胞外物质来杀死藻细胞。而这些抑藻物质通常都存在于无菌滤液中。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种假单胞菌微生物的培养方法，包括以下步骤：

S1、将假单胞菌培养基置于恒温振荡箱培，得假单胞菌液体培养基；

S2、取部分假单胞菌液体培养基，接入EM原液，按假单胞菌的培养条件进行培养，得假单胞菌培养液；

S3、将假单胞菌培养液加到新的假单胞菌培养基中培养；

S4、复壮：重复步骤S2-S3，得到假单胞菌的菌液。

上述假单胞菌培养基中包括乙酸钠、丙酸钠、酵母膏、(NH₄)₂HPO₄、H₂O。

上述恒温振荡箱的转速为130-180r·min^-1。

上述步骤S2和S3的培养时间为48-96h，步骤S4的重复次数为4-5次。

上述步骤S2中接入的EM原液为假单胞菌液体培养基的体积的1％—10％

上述步骤S3中所取假单胞菌培养液的体积为步骤S2制备的假单胞菌培养液的1％—10％。

一种假单胞菌微生物的抑藻应用，包括以下步骤：

K1、取上述培养方法所制得的菌液，离心，得到下层的假单胞菌的菌体；

K2、清洗菌体后，加入BG-11培养液制成假单胞菌悬浊液；