[发明专利]一种用于甜瓜组织中氯吡脲质谱成像方法

权利要求书

1.一种用于甜瓜组织中氯吡脲质谱成像方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将氯吡脲溶液处理的甜瓜组织和未经氯吡脲溶液处理的甜瓜组织分别进行冷冻切片，将得到的两种组织切片转移至导电载玻片上，自然风干；

2)将步骤1)中两种风干后的甜瓜组织切片分别用带有激光的成像质谱仪采集光学图像，得到施药组甜瓜组织切片光学图像和空白对照组甜瓜组织切片光学图像；

3)将步骤1)中两种风干后的甜瓜组织切片分别蒸镀α-氰基-4-羟基肉桂酸，再喷涂色谱级纯甲醇，得到施药组涂覆基质的甜瓜组织切片和空白对照组涂覆基质的甜瓜组织切片；

蒸镀α-氰基-4-羟基肉桂酸的时间为20min；

4)将步骤3)中所述施药组涂覆基质的甜瓜组织切片和空白对照组涂覆基质的甜瓜组织切片在质谱仪中进行激光解析电离，得到施药组甜瓜组织切片质谱图像和空白对照组甜瓜组织切片质谱图像；

5)通过数据处理软件处理获得氯吡脲在施药组甜瓜组织切片上相应质谱图像，并与步骤2)中所述施药组甜瓜组织切片光学图像重合比较分析，根据空白对照组甜瓜组织质谱图像与光学图像重合比较分析结果，去除甜瓜组织自身基质干扰，得到氯吡脲在甜瓜组织中的空间分布情况。

2.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，步骤4)中所述激光解析电离包括一级质谱和二级质谱；

所述一级质谱的条件如下：测定模式为正离子模式，质荷比扫描范围为200～300，激光能量为45Hz，激光径为25μm；

所述二级质谱的条件如下：测定模式为正离子模式，前体离子为248.05，质荷比扫描范围为50～300，激光能量为51Hz，激光径为25μm。

3.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，步骤3)中喷涂色谱级纯甲醇的体积为1mL/导电载玻片。

4.根据权利要求1所述成像方法，其特征在于，步骤1)中所述冷冻切片前，将氯吡脲溶液处理的甜瓜组织和未经氯吡脲溶液处理的甜瓜组织分别置于液氮中冷冻。

5.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，步骤1)中所述切片采用冷冻切片机进行；所述冷冻切片机的温度设置为-18℃。

6.根据权利要求1、4和5中任意一项所述的成像方法，其特征在于，步骤1)中所述切片时每次切片的厚度为35μm。

7.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，所述氯吡脲溶液处理的甜瓜组织是将甜瓜幼果开花当日用氯吡脲溶液处理，处理后2h摘取获得。

8.根据权利要求1或7所述的成像方法，其特征在于，步骤1)中所述氯吡脲溶液的浓度为20mg/L；所述氯吡脲溶液处理的时间为3～5s。

9.根据权利要求1所述的成像方法，其特征在于，所述未经氯吡脲溶液处理的甜瓜组织是甜瓜幼果开花后当天进行人工授粉，授粉后2h摘取获得。