[发明专利]一株六溴环十二烷降解菌株及其在环境修复中的应用

权利要求书

1.一种六溴环十二烷降解菌株，其特征在于，所述菌株是铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）HS9，已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO. M2019094。

2.如权利要求1所述的六溴环十二烷降解菌株在环境修复中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、采用铜绿假单胞菌HS9；

步骤二、培养铜绿假单胞菌HS9；

步骤三、将步骤二培养的铜绿假单胞菌HS9接种到含有六溴环十二烷的水体中以去除水体中的六溴环十二烷。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述培养包括固体斜面培养和液体培养；所述斜面培养采用含有六溴环十二烷的MSM固体培养基；所述液体培养采用含有六溴环十二烷的MSM液体培养基。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述MSM液体培养基的配方是：K₂HPO₄ 5.2 g/L，KH₂PO₄ 3.7 g/L，MgSO₄ 0.1 g/L，Na₂SO₄ 1.0 g/L和0.05%（v/v）金属离子缓冲液；

其中，所述金属离子缓冲液配方是：FeCl₂·4H₂O 0.3 g/L, MnCl₂·4H₂O 0.02 g/L,H₃BO₃ 0.0124 g/L, CuCl₂·2H₂O 0.0034 g/L, CoCl₂·6H₂O 0.038 g/L, ZnCl₂ 0.014 g/L 和Na₂MoO₄·2H₂O 0.04 g/L，溶于0.1 M的盐酸溶液中；

所述MSM固体培养基由所述MSM液体培养基和琼脂组成，其中所述琼脂的质量体积百分比为1.5~2.0%。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述固体斜面培养具体为：将铜绿假单胞菌HS9菌株接种到含有0.5 ~ 2 mg/L 六溴环十二烷的MSM固体培养基上，25 ~ 37 °C，培养24~ 36小时；

所述液体培养具体为：将所述斜面培养的菌体转接到含有0.5 ~ 2 mg/L 六溴环十二烷的MSM液体培养基中，常温下培养8 ~ 24小时，获得种子液。

6.如权利要求3~5所述的任一项应用，其特征在于，所述液体培养中MSM液体培养基的初始pH值为7.0，培养温度为30°C。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤三具体操作包括：将所述种子液中的菌体接种到含有六溴环十二烷的水体中，培养10 ~ 20天；期间，每2天取样，用超高效液相色谱-三重四极杆质谱检测六溴环十二烷和/或其降解产物。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述超高效液相色谱-三重四极杆质谱检测六溴环十二烷的条件包括：Agilent 1260高效液相色谱仪配备Eclipse XDB-C18分析柱；流动相A：0.1 mM 乙酸钠水溶液，流动相B：100%甲醇；梯度洗脱；流速为0.25 mL/分钟，检测波长为200 nm，柱温为30 °C；

所述梯度洗脱为：0.0 ~ 25.0分钟，流动相B的体积百分比由85%升至100%，25.0 ~25.1分钟，流动相B的体积百分比从100%降至85%，并维持到35分钟；或者

0.0 ~ 25.0分钟，流动相B的体积百分比由95%升至100%，25.0 ~ 25.1分钟，流动相B的体积百分比从100%降至95%，并维持到35分钟。

9.一种铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）HS9 CCTCC NO. M2019094在制备降解六溴环十二烷的制剂方面的应用。