[发明专利]一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法

权利要求书

1.一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)Ru(dcbpy)₃²⁺-DNA1复合材料的制备：

将三(4,4-二羧基联吡啶)氯化钌溶于磷酸盐缓冲溶液中，将1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺混合溶液加入到上述溶液中搅拌，之后加入DNA1继续搅拌，再加入乙酸钠溶液和乙醇进行沉淀反应，离心、洗涤、干燥，得到Ru(dcbpy)₃²⁺-DNA1复合材料；

(2)g-C₃N₄QDs-DNA2复合材料的制备：

将1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺混合溶液加入到g-C₃N₄QDs溶液中，搅拌后加入DNA2溶液继续进行搅拌，得到g-C₃N₄QDs-DNA2复合材料；

(3)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨进行抛光处理，直到呈镜面，用乙醇和二次水超声清洗；

(4)配制含有汞离子标准液、Ru(dcbpy)₃²⁺-DNA1、g-C₃N₄QDs-DNA2和磷酸盐缓冲溶液的混合液；

(5)取步骤(4)所得的混合液修饰到经步骤(3)处理的电极上，室温下进行干燥；

(6)在步骤(5)处理的电极上修饰Nafion进行材料固定。

2.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，三(4,4-二羧基联吡啶)氯化钌，1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺混合溶液，DNA1，乙酸钠溶液和乙醇的用量比例为4mg：2mL：1.6mL：800μL：16mL；其中，1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺的质量比为4:1，DNA1的浓度为0.5-3μM，乙酸钠溶液的浓度为0.5-5M。

3.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，第一次搅拌为室温下搅拌2h；第二次搅拌为25℃下搅拌6-12h，搅拌速度为100rpm；沉淀反应5-12h，温度-30-1℃。

4.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺混合溶液、g-C₃N₄QDs的溶液、DNA2溶液的用量比例为400μL：1.6mL：1.6mL；其中，1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺混合溶液中，1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和N,N-二甲基甲酰胺的浓度比为4mM:1mM；g-C₃N₄QDs的溶液的浓度为1-5mg·mL^-1，DNA2溶液的浓度为0.5-3μM。

5.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，第一次搅拌为室温下搅拌15min；第二次搅拌为室温下搅拌1h。

6.根据权利要求1所述的一种检测汞离子的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，玻碳电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm和0.05μm。