[发明专利]一种检测人类Y染色体快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒及应用

说明书

本发明提供了一种检测27个人类Y染色体快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，可在单个反应中多重扩增Y染色体上27个高突变率的STR基因座。本发明通过设计独特的基因座排布和特异性引物，将27个Y染色体快速突变STR基因座分为四组并分别标记不同的荧光染料。本发明的复合扩增系统包含的全部为突变率高、多态性高的Y染色体STR基因座，男性个体识别能力高，在家系细分和案件排查中可作为常规Y染色体STR试剂盒的有效补充。所述荧光标记复合扩增系统引物特异性好、检材适应性强，方法操作简便，检测耗时短、效率高。

技术领域

本发明涉及分子遗传学领域，具体涉及一种检测人类Y染色体27个快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒及其应用，可应用于亲权鉴定、建库排查、DNA家谱构建等方面。

背景技术

近年来，法医DNA分型技术的发展迅猛，目前已经能对多种检材进行DNA分型，达到认定水平，成为刑事技术中科技含量最高、实用性最强的方法之一，技术水平基本同世界同步，检验结果得到了司法机关特别是审判机关的普遍采信，DNA分析技术成为刑事侦查和法庭审判的最重要依据之一。

目前，国内外广泛使用的法医DNA检测试剂盒主要针对的是常染色体STR、X染色体STR以及低突变Y染色体STR。由于Y染色体STR具有男性特有、父系遗传及单倍型遗传等三大特征，将其独特性与STR位点分型检测的优越性相结合，可在高概率水平上进行法医学个体识别、父权鉴定、混合斑男性成分检测及无名男尸身源确认等，解决了常染色体STR面临的困境。

现有的低突变Y染色体STR的男性属性和父系遗传方式使其在法医学性犯罪案件调查、父系亲缘关系鉴定及现场生物检材群体来源推断等方面具有独特应用价值，但也存在同一父系男性个体间无法有效区分的局限性。此外，一些相对封闭或经历了瓶颈效应的群体，因Y染色体基因多态性较差，导致Y染色体STR分型应用价值较低。鉴于此，加入多态性好、突变率高的快速突变Y染色体STR(rapidly mutating Y-STR，简称RM Y-STR)基因座将在一定程度上解决Y染色体STR分型的法医学应用的局限。

发明内容

本发明旨在提供一种检测人类Y染色体27个快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒及其应用，该试剂盒具有高分辨率、高突变率的特点，能够满足同一家系男性个体识别的需求。

本发明为实现上述目的，所采取的技术方案如下：

一种检测人类Y染色体快速突变STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，试剂盒含有用于特异性扩增27个Y染色体快速突变STR基因座的19组引物对，27个基因座为DYF387S1a/b、DYF399S1a/b/c、DYF403S1a1/a2/a3/b、DYF404S1a/b、DYS449、DYS508、DYS516、DYS518、DYS526a/b、DYS534、DYS547、DYS565、DYS570、DYS573、DYS576、DYS612、DYS626、DYS627和DYS640。

扩增27个快速突变STR基因座的19组引物对序列如下表1所示：

表1.RM Y27引物序列

DYF387S1a和DYF387S1b的扩增引物相同；DYF399S1a、DYF399S1b和DYF399S1c的扩增引物相同；DYF403S1a1、DYF403S1a2、DYF403S1a3和DYF403S1b的扩增引物相同；DYF404S1a和DYF404S1b的扩增引物相同；DYS526a和DYS526b的扩增引物相同。

进一步，每个基因座上游引物的5’端标记有荧光染料。