[发明专利]一种使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法

说明书

本发明公开了一种使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法，包括：使用UVB照射方法诱导人参毛根培养；利用诱导后的毛根作为愈伤组织，分离富含人参皂苷的细胞；制作人参皂苷。该制备方法培育出原生态的人参皂苷活性细胞作为活性物，保证了人参皂苷的活性效力，不但能长期保持人参皂苷活性物的品质，而且使得人参皂苷活性物成品化，简化了制备程序，成品化的人参皂苷活性物可供按需配量，进而提高了人工调控产品的可控性，本发明具有操作方法简单、生产成本低、并能够适用于大规模生产的特点。

技术领域

本发明涉及生物活性物制备技术领域，特别是涉及一种使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法。

背景技术

人参作为五加科人参属多年生双子叶植物，具有增强免疫力、预防及治疗心血管疾病、保护肝脏、调节血糖、延缓衰老、增强学习及记忆能力的作用，常用于药品、保健品及化妆行业。

人参皂苷作为人参中的一类主要活性成分，其产量低，目前尚未人工合成，目前，人参主要依赖大田培养，然而栽培的人参栽培技术复杂，生长周期长，使人参的时长呈现供不应求的状态，为了解决这个问题，满足人们的需求，人们常识通过各种途径来提高人参次级代谢产物的含量，如组织培养基反应器扩大培养，补料培养、毛状根的诱导、诱导子的添加等。

目前，采用水解乳蛋白和茉莉酸甲酯这两种诱导子的协同作用在人参不定根培养中的先例较少。

因此，现有技术需要改进。

发明内容

本发明实施例所要解决的一个技术问题是：提供一种使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法，以解决现有技术中存在的问题。

根据本发明实施例的一个方面，提供的一种使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法，包括：

使用UVB照射方法诱导人参毛根培养；

利用诱导后的毛根作为愈伤组织，分离富含人参皂苷的细胞；

制作人参皂苷。

基于上述使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法的另一个实施例中，所述使用UVB照射方法诱导人参毛根培养的条件为：

在34日龄的人参毛根培养物时，使用86.4千焦/平方米的UVB照射方法处理，异黄酮干重为533.54+-13.61ug/g干重，是对照的2.29倍；

分离时更换培养基，照射能量为3瓦/平方米，照射环境为28±1℃，照射时间为4小时，UVB波长为313nm，总能量为43.2千焦/平方米。

基于上述使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法的另一个实施例中，所述利用诱导后的毛根作为愈伤组织，分离富含人参皂苷的细胞包括：

挑选生长良好的人参不定根接种到改造的3/4MS液体培养基中，培养条件为：无菌、23±2℃、无菌空气通气量为0.3-0.5vvm；

培养28-30天，加入作为诱导子的水解乳蛋白水溶液母液和茉莉酸甲酯乙醇溶液母液，使水解乳蛋白终浓度为98-100毫克/升，使茉莉酸甲酯终浓度为8-10毫克/升，继续培养2-7天，收获；

干燥，灭菌；

所述改造的3/4MS液体培养基用如下方法制成：在3/4MS液体培养基中加入蔗糖使终浓度为30-40克/升，加入吲哚丁酸使终浓度为3-5毫克/升，加入激动素终浓度为0.05-0.1毫克/升，调节PH为5.8-6.0。

基于上述使用UVB照射方法诱导人参毛根生产人参皂苷的方法的另一个实施例中，所述水解乳蛋白水溶液母液使用如下方法制成：

将水解乳蛋白用蒸馏水溶解配置成浓度为1毫克/毫升的溶液，经0.22微米滤膜过滤灭菌。