[发明专利]一种检测畜禽体内环丙沙星残留的方法

权利要求书

1.一种检测畜禽体内环丙沙星残留的方法,包括样品的预处理和HPLC分析，其特征在于，所述样品的预处理包括如下步骤：

取洁净干燥的畜禽毛发，加入提取液，于不低于65℃下至少提取24h，取上清液，去除上清液中有机物，得待测样品；

所述提取液为三氟乙酸酸化甲醇，所述三氟乙酸在甲醇中浓度为0.2mol/L；

所述待测样品的制备是在绝氧或限氧环境下进行；

所述去除上清液中有机物是在35~45℃下进行吹氮处理；向所述畜禽毛发中加入提取液前还包括如下步骤：

取畜禽脖颈区域的毛发，用纯水洗涤至少3次，剪成4~6mm小段，于40~60℃下烘干，密封待用；所述HPLC分析的色谱条件为：

色谱柱：C18 250mm×4.6nm，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，粒径为5μm；

流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸溶液，乙腈和0.05mol/L磷酸溶液的体积比为15:85；

流速：0.8mL/min；

进样量：10μL；

柱温：30℃；

检测器：荧光检测器，激发波长为280nm，发射波长为450nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述HPLC分析前还包括环丙沙星标准溶液及待测样品溶液的配制，具体包括如下步骤：

取环丙沙星标准品，加入所述流动相稀释成至少3种不同浓度的环丙沙星标准溶液；

取所述待测样品，加入所述流动相，充分溶解所述待测样品，即得所述待测样品溶液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述HPLC分析包括如下步骤：

吸取不同浓度的所述环丙沙星标准溶液10μL注入HPLC分析仪，根据测定结果绘制环丙沙星峰面积-溶液浓度的标准曲线图；

吸取所述待测样品溶液10μL注入HPLC分析仪，根据峰面积及所述标准曲线图，计算得到所述待测样品溶液中环丙沙星的含量。