[发明专利]一种精胺枝接化米糠多糖的制备方法以及基因载体

权利要求书

1.一种精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S10、将米糠多糖与高碘酸钾在20～30℃下搅拌反应使米糠多糖被氧化，得到氧化米糠多糖；

步骤S20、将氧化米糠多糖配制成第一溶液，将精胺配制成第二溶液，然后将所述第一溶液加入到所述第二溶液中形成待反应液，在20～30℃下搅拌反应20～26h，得到生成有氧化米糠多糖-精胺共轭物的混合液；

步骤S30、向所述混合液中加入硼氢化钠后，在20～30℃下搅拌反应使所述氧化米糠多糖-精胺共聚物还原，得到透明的无色溶液；

步骤S40、对所述无色溶液进行提纯和干燥，得精胺枝接化米糠多糖。

2.如权利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S10具体包括：

步骤S11、将米糠多糖配制成多糖水溶液，然后向所述多糖水溶液中加入高碘酸钾，在20～30℃、避光条件下搅拌反应45～50h，得到反应液；

步骤S12、采用双蒸水在3～5℃下对所述反应液进行透析40～50h，然后收集截留液进行冷冻干燥，得氧化米糠多糖。

3.如权利要求2所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S11中：所述多糖水溶液中的葡萄糖基与所述高碘酸钾的摩尔比为1：(1～1.5)。

4.如权利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S20中：所述待反应液中精胺与醛基的摩尔比为(1.0～1.5)：1。

5.如权利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S20中：所述硼酸盐缓冲液的摩尔浓度为0.1～0.2mol/L、pH值为10.0～11.0。

6.如权利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S20包括：

步骤S21、将氧化米糠多糖溶解于双蒸水中制成第一溶液，将精胺溶解于硼酸盐缓冲液中制成第二溶液；

步骤S22、采用滴加的方式将所述第一溶液逐步滴加入所述第二溶液中混合形成待反应液，并在20～30℃下搅拌反应20～26h，得到生成有氧化米糠多糖-精胺共轭物的混合液。

7.如权利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S30具体包括：

向所述混合液中加入硼氢化钠后，在20～30℃下搅拌反应45～50h后，再次加入硼氢化钠并在20～30℃下搅拌反应20～25h，得到透明的无色溶液。

8.如权利要求1所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法，其特征在于，步骤S40包括：

采用双蒸水在3～5℃下对所述无色溶液进行透析40～50h，然后收集截留液进行冷冻干燥，得氧化米糠多糖，所述透析时选用的透析膜的截留分子量为3000～4000。

9.一种基因载体，其特征在于，所述基因载体包括精胺枝接化米糠多糖，所述精胺枝接化米糠多糖由如权利要求1至8任意一项所述的精胺枝接化米糠多糖的制备方法制得。