[发明专利]一种二苯醚类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种二苯醚类化合物及其制备方法和用途，特点是该二苯醚类化合物的结构式如Ⅰ所示，其制备方法步骤包括将保藏号为CCTCC No:M2014086的焦曲霉通过微生物发酵培养来获取二苯醚类化合物的发酵物，然后将发酵物用甲醇浸泡、乙酸乙酯提取，得粗浸膏，将该粗浸膏经减压硅胶柱层析，凝胶柱层析，中压柱层析和反相半制备高效液相色谱分离纯化得到，优点是该二苯醚类化合物具有抗副溶血弧菌作用，可以作为抗鱼类致病菌副溶血弧菌作用的新药物成分。

技术领域

本发明涉及一种二苯醚类化合物，尤其是涉及一种二苯醚类化合物及其制备方法和用途。

背景技术

二苯醚类天然产物具有良好的生物活性，海洋微生物由于具有来源丰富、生长环境多样、代谢途径特殊等特点，是最大的二苯醚类天然产物的生产者。本发明人研究得知，海绵共生真菌Aspergillusustus.（保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNo: M2014086）的固体发酵的乙酸乙酯提取物有较好的抗弧菌活性，遂对其天然产物进行分离。目前尚未见该化合物的化学结构及抗弧菌活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抗副溶血弧菌活性的二苯醚类化合物及其制备方法和用途。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

1、一种二苯醚类化合物，该化合物的结构式如Ⅰ所示：

（I）。

2、一种二苯醚类化合物的制备方法，具体包括如下步骤：

（1）发酵生产

将保藏号为CCTCC No: M2014086 的焦曲霉（Aspergillus ustus）在含有固体PDA培养基的平板上划线活化，置于28℃培养箱中培养5天；用灭过菌的牙签在平板上挑取一个单菌落接种到液体PDA培养基中，然后置于摇床上培养，温度28℃，转速为180rpm/min，培养2天后收集为种子液，然后把种子液接种到含有固体大米培养基的锥形瓶中，于温度28℃，静置发酵培养40天，获得发酵物；

（2）浸膏的获得

将上述发酵物加入甲醇中，超声破碎后放置过夜，将甲醇提取液用纱布过滤去除固体残渣；将固体残渣重复浸提3-5次后，将甲醇提取液合并后蒸干，用水复溶，再用与复溶液等体积的乙酸乙酯重复萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，将乙酸乙酯萃取液旋转蒸发至干后，获得粗浸膏；

（3）化合物的分离精制

将上述粗浸膏首先用体积比为1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂溶解后，加200-300目硅胶拌样，采用体积比为1：2的石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂，进行VLC减压柱层析，收集洗脱组分；再采用体积比为1：1的二氯甲烷/甲醇为洗脱剂对收集的组分进行LH-20凝胶柱层析，收集洗脱组分；然后采用甲醇和水为洗脱剂，对收集的组分进行中压柱层析；最后将收集的洗脱液经过半制备反相高效液相色谱对化合物进行分离纯化，流动相为水和乙腈，得到二苯醚类化合物，其结构如式I所示：

（I）。

步骤（1）中所述的固体大米培养基的配制方法如下：将80 g大米和35 g海盐溶于120 mL海水中配制而成。

所述的中压柱层析中梯度洗脱剂为甲醇和水，甲醇从35~90%，洗脱时间120min；所述的半制备反相高效液相色谱的洗脱剂为乙腈与水按体积比30：70的比例混合。

3、上述二苯醚类化合物的用途，所述的二苯醚类化合物用于制备鱼类致病菌副溶血弧菌抑制剂方面的用途。