[发明专利]一种异养硝化-好氧反硝化菌及其鉴定方法有效
| 申请号： | 201910170184.9 | 申请日： | 2019-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN109880752B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 张碧军;王成;汪丽佳;王伟;王科 | 申请（专利权）人： | 杭州民安环境工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/16 | 分类号： | C12N1/16;C12Q1/6895;C12Q1/6869;C12Q1/04;C02F3/02;C02F3/34;C12R1/84 |
| 代理公司： | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人： | 姚宇吉 |
| 地址： | 311200 浙江省杭州市萧山*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 硝化 好氧反 及其 鉴定 方法 | ||
1.一种异养硝化-好氧反硝化菌，其特征在于，菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为 ：CCTCC NO: CCTCC M 2018289，命名为杰丁毕赤酵母
2.根据权利要求1所述的一种异养硝化-好氧反硝化菌，其特征在于，所述杰丁毕赤酵母是以丁二酸钠和硫酸铵为筛选培养基从淤泥中筛选、纯化后得到的。
3.根据权利要求1所述的一种异养硝化-好氧反硝化菌，其特征在于，所述杰丁毕赤酵母具有脱氮能力。
4.根据权利要求1所述的一种异养硝化-好氧反硝化菌，其特征在于，所述杰丁毕赤酵母的26S rDNA 序列如下所示：
AGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGCCTCAGTAACGGCGAGTGAAGCGGCAAAAGCTCAAATTTGAAATCTGAGGCTTTCAGCCCCCGAGTTGTAATTTGAAGATGGTGTTCTGGCGCCGGCGCCCTGTCTACGTTCCTTGGAACAGGACATCACAGAGGGTGAGAATCCCGTCTGGCGGGGCGGCCTGGCTCCGTGTAGAGCGCCATCGACGAGTCGAGTTGTTTGGGAATGCAGCTCTAAGTGGGTGGTAAATTCCATCTAAAGCTAAATATTGGCGAGAGACCGATAGCGAACAAGTACAGTGATGGAAAGATGAAAAGAACTTTGAAAAGAGAGTGAAAAAGTACGTGAAATTGTTGAAAGGGAAGGGTATTGGATCAGACTTGGTGCTGTGCGAATAGCGGCTCTTCTTGGGCCGCCCACTCGCACTCCACCGGGCCAGCATCGGTTTGGGCGGCAAGACAATGGCGGGGGAACGTGGCACTGCTCTCGGGCAGTGTGTTTATAGCCCCCGCTGATGTTGCCTGCCTAGACCGAGGACTGCGGCTTCTGCCTAGGATGCTGGCGTAATGATCCAACACCGCCCGTC。
5.一种异养硝化-好氧反硝化菌的鉴定方法，其特征在于，包括：
扩增菌株的26S rDNA片段；所述扩增菌株的26S rDNA片段采用的模板采用的杭州宝赛生物公司的微生物基因组提取试剂盒中提取MA1基因组DNA；
加入鉴定引物，NL1：5'-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-3'；NL4：5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3'；
采用PCR反应体系纯化；PCR反应体系为：模板DNA 1μL，2xPCR superpfu mix 25μL，27F和1492R引物各1 μL，加无菌去离子水至反应体系为50μL；PCR程序为：94 ℃ 5min，【94 ℃30s，55 ℃ 30s，72 ℃ 1min 30s】x30循环，72℃ 5 min，4℃5min；
送基因测序公司进行测序，获得MA1菌株的26S rDNA 序列如下所示：
AGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGCCTCAGTAACGGCGAGTGAAGCGGCAAAAGCTCAAATTTGAAATCTGAGGCTTTCAGCCCCCGAGTTGTAATTTGAAGATGGTGTTCTGGCGCCGGCGCCCTGTCTACGTTCCTTGGAACAGGACATCACAGAGGGTGAGAATCCCGTCTGGCGGGGCGGCCTGGCTCCGTGTAGAGCGCCATCGACGAGTCGAGTTGTTTGGGAATGCAGCTCTAAGTGGGTGGTAAATTCCATCTAAAGCTAAATATTGGCGAGAGACCGATAGCGAACAAGTACAGTGATGGAAAGATGAAAAGAACTTTGAAAAGAGAGTGAAAAAGTACGTGAAATTGTTGAAAGGGAAGGGTATTGGATCAGACTTGGTGCTGTGCGAATAGCGGCTCTTCTTGGGCCGCCCACTCGCACTCCACCGGGCCAGCATCGGTTTGGGCGGCAAGACAATGGCGGGGGAACGTGGCACTGCTCTCGGGCAGTGTGTTTATAGCCCCCGCTGATGTTGCCTGCCTAGACCGAGGACTGCGGCTTCTGCCTAGGATGCTGGCGTAATGATCCAACACCGCCCGTC；
MA1菌株为杰丁毕赤酵母
分析表明该菌株属于
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