[发明专利]一种提高重组枯草芽孢杆菌合成N-乙酰氨基葡萄糖效率的方法

权利要求书

1.一种重组枯草芽孢杆菌制备N-乙酰氨基葡萄糖的方法，其特征在于，应用重组枯草芽孢杆菌进行发酵培养得到N-乙酰氨基葡萄糖；所述重组枯草芽孢杆菌以枯草芽孢杆菌自身的功能膜微域FMMs作为空间支架，通过双质粒系统表达FMMs定位功能结构域SPFHdomain、氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶GlmS与氨基葡萄糖-6-磷酸乙酰化酶GNA1；以工具小肽CC-Di-A和CC-Di-B分别调控氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶GlmS与氨基葡萄糖-6-磷酸乙酰化酶GNA1，使GlmS与GNA1化学计量比为1:1～3；双质粒系统中包括A质粒和B质粒，A质粒为pHT01，用于表达SPFH domain、氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶GlmS和CC-Di-A，B质粒为pP43，用于表达氨基葡萄糖-6-磷酸乙酰化酶GNA1和CC-Di-B；所述CC-Di-A的氨基酸序列如SEQ IDNO .5所示，所述CC-Di-B的氨基酸序列如SEQ ID NO .6所示。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，重组菌在35～38℃下在种子培养基中活化，活化后的种子以2-5％的接种量接入发酵培养基中，在35～38℃下发酵培养。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，发酵培养基以其重量为基准，包括以下成分：30-60g/L葡萄糖、5～8g/L蛋白胨、10～15g/L酵母粉、5～8g/L硫酸铵、10～15g/L磷酸氢二钾、2～3g/L磷酸二氢钾、4～6g/L碳酸钙和8～12ml/L微量元素溶液；微量元素溶液以其重量为基准，包括以下成分：0 .8～1 .2g/L硫酸锰、0 .2～0 .6g/L氯化钴、0 .1～0 .3g/L钼酸钠、0 .1～0 .3g/L硫酸锌、0 .1～0 .3g/L氯化铝、0 .1～0 .3g/L氯化铜、0 .04～0.06g/L硼酸和3～8mol/L盐酸。

4.权利要求1-3任一所述的方法在制备含N-乙酰氨基葡萄糖产品中的应用。