[发明专利]小球藻多糖的制备方法

权利要求书

1.小球藻多糖的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：

步骤一、将对数期球藻种接种至培养基中，进行培养；培养基为BG-11培养基，培养基中MgSO₄·7H₂O的浓度为112.5mg/L，K₂HPO₄浓度为60mg/L，NaNO₃浓度为1.2g/L；

步骤二、培养至稳定期后，将培养液进行离心分离，收集沉淀，得藻泥；

步骤三、向步骤二得到的藻泥中加入3倍重量的无水乙醇，随后置于4℃冰箱中过夜，然后进行离心分离，收集沉淀，并置于60℃的烘箱中烘干，得藻粉；

步骤四、取步骤三得到的藻粉，提取小球藻多糖。

2.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，步骤四具体为：向步骤三得到的藻粉中加入提取液，超声振荡处理20min，然后将藻粉和提取液的混合物置于80℃的水浴中加热，2h后取出，冷却至室温后离心分离，取上层清液，向上层清液中加入3倍体积的无水乙醇，并置于4℃的冰箱中，静置一夜后取出并离心收集沉淀，并向该沉淀中加入质量分数为3％的三氯乙酸溶液，充分搅匀至沉淀不再溶解，于4℃下离心，取上清液，得多糖提取物，将多糖提取物过0.45um的微孔过滤膜，收集滤液，向滤液中加入3倍体积的无水乙醇，置于4℃的冰箱中，静置一夜后取出并离心收集沉淀，并冷冻干燥，即得小球藻多糖。

3.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，培养基中加入有浓度分别为0.5mg/L和0.1μg/L的维生素B₁和维生素B₁₂。

4.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，步骤一中，接种培养条件为：光照强度2000lux，暗光比：12/12，温度为24±1℃。

5.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，步骤四中的提取液为体积分数为4％的NaOH水溶液，干藻粉与NaOH的物料比为1:25。

6.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，步骤四中，超声振荡的功率为80w。

7.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，步骤一～步骤四中的离心处理的转速均为4800r/min。

8.如权利要求1所述的小球藻多糖的制备方法，其特征在于，球藻种为小球藻EC04或小球藻DC01。