[发明专利]牛膝叶中亚油酸的提取方法

说明书

本发明公开了一种牛膝叶中亚油酸的提取方法，属于亚油酸的提取技术领域。本发明的技术方案要点为：将牛膝叶晾干粉碎，正己烷浸提后，经皂化处理，在低温下进行尿素包合，即得到亚油酸。本发明所提供的牛膝叶中亚油酸的提取方法，操作简单，亚油酸提取率好，所用试剂价格低廉，来源广泛，易于获得，为亚油酸的生产工艺研究及牛膝叶的开发利用提供了新思路。

技术领域

本发明属于亚油酸的提取技术领域，具体涉及一种牛膝叶中亚油酸的提取方法。

背景技术

多项研究数据显示，亚油酸可以显著降低血液脂肪水平、软化中小血管、缓和血压、增加血液循环、间接恢复神经功能等作用，可减少心脑血管疾病的病患率，特别是对冠心病、动脉粥样硬化、老年肥胖症等疾病的防治有积极的意义。

大量研究发现牛膝富含三萜皂苷类、多糖类、生物碱类等成分，近来又有研究表明其中富含油脂成分。牛膝属苋科，为多年生草本植物，是我国常用的大宗中药材之一，主要在河南、四川一带种植。为了进一步发掘牛膝叶的实用价值，需提供一种操作简单且效率较高的亚油酸的提取方法。

亚油酸是一种不饱和脂肪酸，其提取方法较多，其中尿素包结合法因为所需设备简易、操作简单易学、成本较低及所得不饱和脂肪酸纯度较高而受到广泛的应用。此外，尿素包合法是在低温下进行操作的，能最大程度保存亚油酸的生物活性，不会因发生异构化和聚合反应丧失亚油酸的营养和生理活性。因此，尿素包合法是用于亚油酸大规模分离纯化的理想方法。

发明内容

本发明采用尿素包合法首次从牛膝叶中提取到了亚油酸，且具有操作简单、提取率好、纯度高等优点，拓宽了牛膝叶的研究范围，为其深入开发提供了新的思路。

为实现提取亚油酸的目的，本发明采用下述技术方案：牛膝叶中亚油酸的提取方法，其特征在于具体步骤为：

步骤S1：将牛膝叶晾干粉碎成牛膝叶粉，按牛膝叶粉与正己烷料液比1g:3～8mL加入正己烷浸提，浸提温度为40～60℃，浸提时间为1～5h，重复提取1～3次，滤液经减压蒸馏除去溶剂正己烷得到牛膝叶的混合油脂；

步骤S2：取步骤S1浸提的混合油脂，按混合油脂与NaOH-C₂H₅OH溶液料液比1g:2～4mL加入NaOH-C₂H₅OH溶液，在75～85℃水浴中反应1.5～3h，用盐酸溶液调节混合体系的pH值至1～3，搅拌均匀，分出油层，加入10倍体积油层样量的正己烷萃取，并水洗至中性，减压蒸馏除去溶剂正己烷，加入干燥剂除水干燥得到混合脂肪酸；

步骤S3：取乙醇加热至70℃，边搅拌边加入尿素，使尿素完全溶于乙醇中得到尿素-乙醇溶液；

步骤S4：取步骤S2得到的混合脂肪酸，按尿素与混合脂肪酸质量比1～3:1加入到步骤S3得到的尿素-乙醇溶液中，维持温度75～85℃，回流搅拌30～70min，待混合物变澄清透明后停止加热，继续搅拌冷却至室温；

步骤S5：在-10～5℃下包合5～25h，将所得尿素包合混合物过滤分离，用石油醚洗涤结晶物得到滤液；

步骤S6：向步骤S5得到的滤液中加入石油醚和稀碱液，萃取，得到有机相，将有机相水洗至中性，再用干燥剂干燥，旋转蒸发去除石油醚得到亚油酸。

优选的，步骤S1中所述牛膝叶粉与正己烷的料液比为1g:6mL。

优选的，步骤S1中所述浸提温度为50℃，浸提时间为2h，重复提取2次。

优选的，步骤S3中所述尿素-乙醇溶液的浓度为50～300g/L。

优选的，步骤S3中所述尿素-乙醇溶液的浓度为100g/L。

优选的，步骤S4中所述尿素-乙醇溶液中尿素与混合脂肪酸的质量比为 2:1。