[发明专利]一种用于抗体药物偶联物的药物-连接子MC-MMAF的制备方法及其中间体

说明书

本发明提供一种用于抗体偶联药物的药物‑连接子MC‑MMAF的制备方法及其中间体。本发明的制备方法提高了N端的反应活性，从而有效的控制了消旋反应的发生；不直接使用毒素MMAF，而采用毒性较低的化合物，降低了大量生产时的操作难度；无需反相制备，操作简便。

技术领域

本发明涉及有机合成领域，特别涉及一种用于抗体药物偶联物的药物-连接子MC-MMAF的制备方法及其中间体。

背景技术

抗体药物偶联物(Antibody drug conjugate，简称ADC)是一类新型的抗肿瘤药物，其原理是将细胞毒素连接在抗体上，通过抗体对癌细胞表面特定抗原的识别，通过内吞作用进入癌细胞，从而将细胞毒素运输到靶点，达到靶向性治疗恶性肿瘤的目的。ADC与传统的小分子抗肿瘤药物相比，因能借助抗体的靶向识别性与毒素的高活性，故更具备特异性和有效性。

ADC包括三个不同的组成部分，即抗体、连接子和细胞毒素。抗体实现靶向性，连接子保证在ADC在血液转运过程中的稳定性，而到达作用靶点后，毒素发挥对癌细胞的杀伤作用。根据作用机制的不同，适用于ADC的毒素分为微管类抑制剂(Microtubuleinhibitors)，DNA损伤剂(DNA damaging agents)，RNA聚合酶抑制剂(RNA polymeraseinhibitors)等。目前，市场上销售和临床试验中的ADC所采用的毒素主要为微管类抑制剂，主要包括基于海兔毒素(Dolastatin-based)设计的化合物，比如MMAE、MMAF和MMAD，以及基于美登素(Maytansine-based)设计的化合物，比如DM1和DM4。连接子方面，主要应用的为不可裂解型，如缬氨酸-瓜氨酸(Valine-Citriline)和环己基甲酸(MCC)，经过溶酶体水解后，药物仍然具有活性，并通过连接区与某个氨基酸残基结合在一起。

抗体药物偶联物的形成方式有多种。既可以通过抗体上的氨基或巯基和药物连接子进行化学反应偶联，也可以对抗体进行修饰，在抗体上引入特定功能基后，再和药物连接子进行化学反应偶联或酶催化反应偶联。本发明涉及的抗体药物偶联物MC-MMAF结构如下所示。

目前文献报道的MC-MMAF的合成路线为使用毒素MMAF与MC-hex-Acid(1-马来酰亚胺基正己酸)发生脱水反应，得到MC-MMAF。MMAF的结构为：

文献报道的合成方案为：

该路线MMAF的N终端缬氨酸的N上带有一个甲基，位阻较大，在这种情况下，将1-马来酰亚氨基正己酸接到MMAF上反应速度就会较慢，即使采用不同的酰胺缩合剂，也会造成MMAF的苯丙酰胺基连接的手性碳消旋。该路线用于小于1g的MC-MMAF合成，最后要应用高压反相制备除去异构杂质，产率低于50％。

该反应路线在放大生产时表现出一定的缺陷，比如：1.该方法因为缩合剂会同时活化MMAF上的羧基，而造成30-50％的消旋，形成难以除去的异构体杂质，影响产率；2.由于前述的位阻原因，反应时间长，杂质多，给反应的后处理和纯化造成困难；3.最终产物需要高压反相制备除去异构体，增加操作成本；4.直接应用毒素MMAF为原料，在大量合成操作上需做好防护，选择好防护设备，为生产操作带来障碍。

发明内容

一方面，针对现有技术存在的缺陷，本发明提供一种MC-MMAF的合成方法，该反应的关键是用结构式为的化合物与L-苯丙氨酸发生缩合反应直接得到MC-MMAF或其盐，R选自氢、琥珀酰亚胺基、五氟苯基、对硝基苯基、邻苯二甲酰胺基中的一种或多种。

本发明的上述目的采用以下技术方案来实现。

该合成方法包括如下步骤：1)将化合物溶解于合适的溶剂中，与发生酰胺缩合反应，得到MC-MMAF。